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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌怎么没有了
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九月1

铁虫 (初入文坛)

[交流] 大肠杆菌怎么没有了 已有4人参与

我买了大肠杆菌的冻干粉菌种，在试管液体培养基（5ml）中培养18h后在液体表面长出几个白白的圆圆的菌落似的的东西，然后24h后变大了，我就转接到装有50ml液体培养基的三角瓶中，现在培养了20h了，可是什么也没有。。。没有菌落，一个白点儿都没有了。。。是大肠杆菌死了吗？还是我转接的时候不小心把细菌落在试管壁上没接进来？试管已经高温灭菌了，怎么办？我第一次养细菌，之前是学物理偏材料的，希望哪个好心人能帮帮我！
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青春不止，阳光仍在
1楼 2013-11-06 09:37:15
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物
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amisking: 金币+2, 应助指数+1, 感谢发帖应助，帮助虫子 2013-11-06 20:58:45
amisking: 回帖置顶 2013-11-06 20:58:47
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5楼: Originally posted by 九月1 at 2013-11-06 10:38:29
是变浑浊了，但是没有菌落，我转接了4个三角瓶，还有一个里面居然有一点儿絮状的东西。。。师兄师姐们只养过藻对细菌一点儿不了解，真心是愁...

絮状。。这不合理啊，大肠不会有絮状啊，不会染上别的菌吧！详细的步骤是先把干粉用培养基混成悬液，然后用接种环接一环到试管里，然后放到摇床上培养18小时左右，前面的操作都要在超净台上做，避免染菌，培养基事先也要灭菌处理！最后如果长出来了，培养基会变浑浊，但肯定不会有絮状物！如果还是澄清可能大肠干粉有问题！
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7楼2013-11-06 11:48:27
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eagles123

金虫 (正式写手)
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液体表面长的东西应该不是大肠杆菌
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2楼2013-11-06 10:17:19
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物
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laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-06 14:24:10
冻干粉要先用少量培养基混匀成悬液，然后再接种到液体培养基里，这是标准的做法，直接加干粉进去也可以，但确实有时候会长不出来！
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3楼2013-11-06 10:27:46
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物
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如果培养出来了，你会观察到本来澄清的培养基变浑浊了！
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4楼2013-11-06 10:31:48
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eagles123

金虫 (正式写手)
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如果震荡培养 是不会有菌落的， 菌落是长在平板上， 你可以把涂平板 用选择性培养基 先大概判断下是不是大肠杆菌
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8楼2013-11-06 12:03:46
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sesesy

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10楼: Originally posted by 九月1 at 2013-11-06 18:01:53
嗯，我也不知道，我只看到白白的东西，也不确定就是菌落，现在接种到三角瓶中了，照现在来看，已经浑浊了。但是不确定是不是大肠杆菌。我准备买些鉴别培养基来看一下。鉴别培养基会不会改变细菌的兴致呀？我买的是 ...

我用的是top10 E.coli 按菌落形态可以判断是不是大肠杆菌 你刚接触 保险起见 就取部分做鉴别 这样即使影响也不至于全部被影响
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九月1
13楼2013-11-07 08:26:13
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物
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11楼: Originally posted by 九月1 at 2013-11-06 18:04:45
我们没有超净台，通风橱也没用上，我就直接在桌面上培养的。桌面用75%的酒精擦拭。点了酒精灯，在酒精灯附近做的实验。灭菌这块儿做的还好。但是操作的时候就不很确定了。。。其他三个瓶子还是浑浊没有絮状物。是不 ...

没用超净台根本没法保证不会染菌，我们一直用超净台加酒精灯还要75的酒精消毒！你培养浑浊的菌液之后用接种到固体培养基上培养就有菌落了，在液体里不可能有菌落的，菌落都是在固体上培养出来的！
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14楼2013-11-07 09:06:57
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九月1

铁虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by 原罪的祷告 at 2013-11-06 10:31:48
如果培养出来了，你会观察到本来澄清的培养基变浑浊了！

是变浑浊了，但是没有菌落，我转接了4个三角瓶，还有一个里面居然有一点儿絮状的东西。。。师兄师姐们只养过藻对细菌一点儿不了解，真心是愁
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青春不止，阳光仍在
5楼2013-11-06 10:38:29
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九月1

铁虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by eagles123 at 2013-11-06 10:17:19
液体表面长的东西应该不是大肠杆菌

那怎样判断有没有大肠杆菌呢？
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青春不止，阳光仍在
6楼2013-11-06 10:39:35
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sesesy

新虫 (小有名气)
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大肠杆菌在液体培养基中是不会在液面上出现菌落的 只会观察到培养基变浑浊  所以你第一步培养后看到的白白的有很大的可能不是大肠杆菌菌落
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9楼2013-11-06 14:41:15
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九月1

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by sesesy at 2013-11-06 14:41:15
大肠杆菌在液体培养基中是不会在液面上出现菌落的 只会观察到培养基变浑浊  所以你第一步培养后看到的白白的有很大的可能不是大肠杆菌菌落

嗯，我也不知道，我只看到白白的东西，也不确定就是菌落，现在接种到三角瓶中了，照现在来看，已经浑浊了。但是不确定是不是大肠杆菌。我准备买些鉴别培养基来看一下。鉴别培养基会不会改变细菌的兴致呀？我买的是带编号的菌种，这下看来。。。带编号不带编号是一样的了。。。
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10楼2013-11-06 18:01:53
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