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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌怎么纯化
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

[求助] 大肠杆菌怎么纯化

需要有经验的给于帮助，做转化用的大肠杆菌，最近发现菌种不是很纯，有比所需要的菌（大肠杆菌）个头大点的菌体（大个的长杆菌）、也有菌丝状的东西（显微镜观察能看到一到二根菌丝状的，没有菌球或团，可能是霉菌类的吧）、，平板分过两次，整个平板上（10-5）长出4个菌落，挑其中一个做镜检还是有其它杆菌和菌丝状的东西，请问用什么方法能纯化一下，非常感谢
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希望大家多多交流。
1楼 2012-12-14 11:41:14
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herway

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+2 2013-02-25 10:26:25
请问你的菌是工程菌么？
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2楼2012-12-14 15:52:06
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+2 2013-02-25 10:24:53
一般的纯化都是挑取单克隆的啊
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让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
3楼2012-12-14 19:36:08
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
2楼: Originally posted by herway at 2012-12-14 15:52:06
请问你的菌是工程菌么？

是工程菌
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希望大家多多交流。
4楼2012-12-15 14:44:59
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herway

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般可以加双抗生素，你没提，不知道加没加。
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5楼2012-12-15 17:06:14
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望海思月

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2012-12-16 09:04:01
张香玲1017: 金币+2 2013-02-25 10:25:40
反复的划线挑单菌落纯化，直到纯了为止，有抗性的话加相应的抗生素
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6楼2012-12-15 17:34:04
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damaomao

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
7楼2012-12-16 10:31:29
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
5楼: Originally posted by herway at 2012-12-15 17:06:14
一般可以加双抗生素，你没提，不知道加没加。

没有加抗生素，刚接手的新菌种，看着有杂菌就想把它纯化一下
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希望大家多多交流。
8楼2012-12-18 11:48:35
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
谢谢大家的帮助，看来现在只能反复的划线挑单菌落纯化了
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希望大家多多交流。
9楼2012-12-18 11:49:39
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herway

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2012-12-20 18:57:10
张香玲1017: 金币+3 2013-02-25 10:26:08
引用回帖:
8楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2012-12-18 11:48:35
没有加抗生素，刚接手的新菌种，看着有杂菌就想把它纯化一下...

看看这菌有没有抗性基因，一般基因工程菌都会加双抗生素抗性基因的。在移种、接种培养时，都会加相应的抗生素，一般是四环素、链霉素之类。你问问看带哪个抗性基因。
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10楼2012-12-20 17:14:03
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