24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4119)
>文献求助 (383)
>导师招生 (288)
>虫友互识 (154)
>论文投稿 (141)
>考博 (116)
>博后之家 (110)
>休闲灌水 (107)
>硕博家园 (82)
>考研 (81)
>公派出国 (80)
>基金申请 (70)
>论文道贺祈福 (56)
>教师之家 (55)
>找工作 (49)
>招聘信息布告栏 (32)

返回列表

本帖产生 1 个翻译EPI ，点击这里进行查看

fbook

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 787.5
帖子: 66
在线: 10.8小时
虫号: 635643

[交流] 100金币求两段英文翻译

利用大肠杆菌的偏爱密码子，把三个LNK-16串联起来，根据串联起来的氨基酸残基，通过反向翻译出它的目的基因片段。在目的基因片段两端加入限制性酶切位点和保护碱基，利用SOEingPCR的方法把目的基因片段分成四段互补的引物。人工这合成这四段引物，通过TD-PCR方法最终扩增出目的基因。把目的基因和质粒载体PET30a(+)进行双酶切后，利用T4DNA连接酶重新构建出质粒载体PET30a(+)-LNK-16，通过双酶切和PCR鉴定成功构建了载体，经测序表明与设计的目的基因完全相同。
把含有测序完全正确载体的菌体大量表达，经ITPG诱导后，在大肠杆菌包涵体中表达出目的蛋白，目的蛋白纯化后在三乙醇胺缓冲液中用激肽释放酶酶切，酶解液对大肠杆菌表现出抗菌活性。从而为抗菌肽不能在原核中表达提供的解决的方法，为解决抗菌肽来源问题的研究奠定了一定的基础。

回复此楼

» 猜你喜欢

国家级人才课题组招收2026年入学博士已经有3人回复
青年基金C终止已经有4人回复
青椒八年已不青，大家都被折磨成啥样了？已经有7人回复
为什么nbs上溴没有产物点出现呢已经有10人回复
救命帖已经有11人回复
招博士已经有5人回复
26申博求博导推荐-遥感图像处理方向已经有4人回复
限项规定已经有7人回复
西南交通大学国家级人才团队2026年博士研究生招生（考核制）—机械、材料、力学方向已经有3人回复
英文综述是否需要润色及查重已经有5人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-04-07 08:11:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zs626

金虫 (初入文坛)

翻译EPI: 2
应助: 0 (幼儿园)
金币: 599.1
帖子: 34
在线: 9.5小时
虫号: 474199

fbook(金币+150, 翻译EPI+1): 十分感谢你提的宝贵意见…… 2011-04-09 08:14:25

We connected three LNK-16 peptides by using codon preference of E.coli, and took a reverse translation of its target gene according to the amino acid residues linked together. By adding restriction enzyme sites and protective bases at both ends of the target gene, we divided the target gene into four complementary primers through the method of SOEingPCR. Then we synthesized these four primers and amplified the target gene by TD-PCR. After double digestion of the target gene and plasmid vector PET30a (+), we re-constructed the plasmid vector PET30a (+)-LNK-16 with T4DNA ligase. With double digestion and PCR identification we successfully constructed the vector, and sequencing showed that it was the same as the target gene we designed.

After taking mass expression of vector proved to be completely correct by sequencing and ITPG induction, we expressed the target protein in cytorrhyctes of E.coli. After purification, the protein was digested by kallikrein in triethanolamine buffer, and the enzymolysis liquid showed antibacterial activity to E.coli. Thus, the research provided new method for solving the problem of antimicrobial peptides can not be expressed in prokaryote and laid a foundation for solving the source problem of antibacterial peptides.

备注：
1、原文“把含有测序完全正确载体的菌体大量表达”表达似有错误，“表达菌体”描述有逻辑问题；
2、原文“从而为抗菌肽不能在原核中表达提供的解决的方法”似应改为“从而为抗菌肽不能在原核中表达提供了解决的方法”。
3、水平有限，仅供参考，谢谢。

赞一下