| 查看: 1180 | 回复: 1 | |||
| 本帖产生 1 个 翻译EPI ，点击这里进行查看 | |||
[交流]
100金币求两段英文翻译
|
|||
|
利用大肠杆菌的偏爱密码子，把三个LNK-16串联起来，根据串联起来的氨基酸残基，通过反向翻译出它的目的基因片段。在目的基因片段两端加入限制性酶切位点和保护碱基，利用SOEingPCR的方法把目的基因片段分成四段互补的引物。人工这合成这四段引物，通过TD-PCR方法最终扩增出目的基因。把目的基因和质粒载体PET30a(+)进行双酶切后，利用T4DNA连接酶重新构建出质粒载体PET30a(+)-LNK-16，通过双酶切和PCR鉴定成功构建了载体，经测序表明与设计的目的基因完全相同。 把含有测序完全正确载体的菌体大量表达，经ITPG诱导后，在大肠杆菌包涵体中表达出目的蛋白，目的蛋白纯化后在三乙醇胺缓冲液中用激肽释放酶酶切，酶解液对大肠杆菌表现出抗菌活性。从而为抗菌肽不能在原核中表达提供的解决的方法，为解决抗菌肽来源问题的研究奠定了一定的基础。 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
感觉是下周放榜了
已经有8人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有81人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有7人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有4人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有15人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
祝福！基金中中中！！！！
+1/391
-
今天看到省基金挂了，希望国基面上能中吧
+5/390
-
Data征稿（EI检索收录），选题方向：环境风险管理的数据分析
+5/285
-
北京信息科技大学机电工程学院硕士研究生招生线上宣讲会-8月16日
+5/245
-
山东征女友，坐标济南
+1/161
-
中国科学院深圳先进技术研究院成会明院士\唐永炳国家杰青团队招聘
+2/156
-
转让琼脂糖磁性微球 His标签纯化
+1/90
-
中国科学院空天院精密干涉测量团队招聘光学/算法/机械方向博士后/特别研究助理/工程师
+1/78
-
广西大学 化学化工学院 新入职教师招生 化学、化学工程与技术、材料化工专业
+1/47
-
加拿大/英属哥伦比亚大学曹彦凯课题组招收博后 [机器人/控制方向]
+1/32
-
天津大学环境学院童银栋教授招收博士后（生源要素循环/温室效应/新污染物方向）
+1/30
-
27级博士生 + 福州大学 + 经管学院 + 管理科学与工程（见贴则有指标）
+1/7
-
论文祈福
+1/7
-
申请专利，这些坑我替你踩过了（附避坑指南）
+1/5
-
中国科学院生态环境研究中心环境工程相关方向招收保送硕士和联合培养博士和硕士研究生
+1/4
-
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/4
-
北京理工大学团簇研究团队招聘博士后 （化学+材料）
+1/4
-
华南理工，博士后
+1/3
-
北理工集成电路杰青团队 | 诚招科助理
+1/2
-
国家级人才团队诚聘生物信息相关专业的科研助理
+1/1
fbook(金币+150, 翻译EPI+1): 十分感谢你提的宝贵意见…… 2011-04-09 08:14:25
|
We connected three LNK-16 peptides by using codon preference of E.coli, and took a reverse translation of its target gene according to the amino acid residues linked together. By adding restriction enzyme sites and protective bases at both ends of the target gene, we divided the target gene into four complementary primers through the method of SOEingPCR. Then we synthesized these four primers and amplified the target gene by TD-PCR. After double digestion of the target gene and plasmid vector PET30a (+), we re-constructed the plasmid vector PET30a (+)-LNK-16 with T4DNA ligase. With double digestion and PCR identification we successfully constructed the vector, and sequencing showed that it was the same as the target gene we designed. After taking mass expression of vector proved to be completely correct by sequencing and ITPG induction, we expressed the target protein in cytorrhyctes of E.coli. After purification, the protein was digested by kallikrein in triethanolamine buffer, and the enzymolysis liquid showed antibacterial activity to E.coli. Thus, the research provided new method for solving the problem of antimicrobial peptides can not be expressed in prokaryote and laid a foundation for solving the source problem of antibacterial peptides. 备注： 1、原文“把含有测序完全正确载体的菌体大量表达”表达似有错误，“表达菌体”描述有逻辑问题； 2、原文“从而为抗菌肽不能在原核中表达提供的解决的方法”似应改为“从而为抗菌肽不能在原核中表达提供了解决的方法”。 3、水平有限，仅供参考，谢谢。 |
2楼2011-04-08 16:57:25
