| 查看: 1011 | 回复: 1 | |||
| 本帖产生 1 个 翻译EPI ，点击这里进行查看 | |||
[交流]
100金币求两段英文翻译
|
|||
|
利用大肠杆菌的偏爱密码子，把三个LNK-16串联起来，根据串联起来的氨基酸残基，通过反向翻译出它的目的基因片段。在目的基因片段两端加入限制性酶切位点和保护碱基，利用SOEingPCR的方法把目的基因片段分成四段互补的引物。人工这合成这四段引物，通过TD-PCR方法最终扩增出目的基因。把目的基因和质粒载体PET30a(+)进行双酶切后，利用T4DNA连接酶重新构建出质粒载体PET30a(+)-LNK-16，通过双酶切和PCR鉴定成功构建了载体，经测序表明与设计的目的基因完全相同。 把含有测序完全正确载体的菌体大量表达，经ITPG诱导后，在大肠杆菌包涵体中表达出目的蛋白，目的蛋白纯化后在三乙醇胺缓冲液中用激肽释放酶酶切，酶解液对大肠杆菌表现出抗菌活性。从而为抗菌肽不能在原核中表达提供的解决的方法，为解决抗菌肽来源问题的研究奠定了一定的基础。 |
回复此楼» 猜你喜欢
材料与化工专硕调剂
已经有6人回复
-
086500 325 求调剂
已经有3人回复
-
材料080500调剂求收留
已经有7人回复
-
一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600
已经有6人回复
-
环境工程调剂
已经有9人回复
-
工科材料085601 279求调剂
已经有9人回复
-
287求调剂
已经有5人回复
-
22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术
已经有3人回复
-
289求调剂
已经有3人回复
-
317求调剂
已经有10人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
浙江大学侯阳教授团队诚聘博士后---高性能固态电解质与固态电池器件设计
+1/89
-
文献分享，欢迎引用
+1/86
-
天津理工大学国家杰青王铁课题组招收2026年博士研究生
+1/84
-
春天就该逛吃逛吃
+1/83
-
散金币，求好运，祝面上顺利！
+2/72
-
中国药科大学211-课题组招收2026博士/硕士-有机化学
+1/52
-
光学工程学硕调剂信息
+2/42
-
湘潭大学“过程强化与绿色化工”创新团队补招2026年秋入学博士生
+1/35
-
1
+1/32
-
湖南大学微生物结构与功能实验室2026年计划招收博士研究生
+1/19
-
海南师范大学孙元元老师招生博士，名额1~2个，2026年9月份入学（光电/光热催化方向）
+1/17
-
中国民航飞行学院先进连接团队招收航空宇航、航空机械专业硕士研究生（学硕专硕均可）
+1/10
-
深圳信息职业大学招聘联合培养硕博研究生（急）
+1/9
-
【博士招生】武汉科技大学招收材料、化工、环境、冶金类2026年“申请-考核”制博士生
+1/7
-
211/双一流---石河子大学---有机化学方向招调剂生
+1/7
-
【第三轮招生】澳科大诚招2026年秋季药剂学硕士研究生（3月31日下午18:00截止）
+1/7
-
Top-88悉尼科技大学数据科学/AI 招收2027年入学 校奖 博士生1到2名(国际和本地学生）
+1/7
-
福州大学国家级人才汤育欣教授课题组2026年招收”申请考核制“储能电池方向博士研究生
+1/6
-
2026考研的同学，分数不够？想调剂上岸的同学，来看
+1/3
-
浙江大学高纯分离团队诚聘博士后
+1/1
fbook(金币+150, 翻译EPI+1): 十分感谢你提的宝贵意见…… 2011-04-09 08:14:25
|
We connected three LNK-16 peptides by using codon preference of E.coli, and took a reverse translation of its target gene according to the amino acid residues linked together. By adding restriction enzyme sites and protective bases at both ends of the target gene, we divided the target gene into four complementary primers through the method of SOEingPCR. Then we synthesized these four primers and amplified the target gene by TD-PCR. After double digestion of the target gene and plasmid vector PET30a (+), we re-constructed the plasmid vector PET30a (+)-LNK-16 with T4DNA ligase. With double digestion and PCR identification we successfully constructed the vector, and sequencing showed that it was the same as the target gene we designed. After taking mass expression of vector proved to be completely correct by sequencing and ITPG induction, we expressed the target protein in cytorrhyctes of E.coli. After purification, the protein was digested by kallikrein in triethanolamine buffer, and the enzymolysis liquid showed antibacterial activity to E.coli. Thus, the research provided new method for solving the problem of antimicrobial peptides can not be expressed in prokaryote and laid a foundation for solving the source problem of antibacterial peptides. 备注： 1、原文“把含有测序完全正确载体的菌体大量表达”表达似有错误，“表达菌体”描述有逻辑问题； 2、原文“从而为抗菌肽不能在原核中表达提供的解决的方法”似应改为“从而为抗菌肽不能在原核中表达提供了解决的方法”。 3、水平有限，仅供参考，谢谢。 |
2楼2011-04-08 16:57:25
