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yiye1220

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌中表达包涵体 已有1人参与

在利用大肠杆菌生产重组抗原的过程中遇到以下问题:
1.目的蛋白为包涵体,呈现絮状粘稠状,和正常颗粒状状态不同,是何种原因?
2.发酵后菌体发黑,是什么原因,对后续试验有何影响
3。培养包涵体有哪些注意事项
4。每次试验配置培养基都一样,会是培养基原因导致1,2两种情况吗
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396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

【答案】应助回帖

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yiye1220: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-12-01 10:03:45
首先确定目标蛋白在你要的沉淀中,然后你的沉淀是呈絮状的?
第二,细胞的破碎方式,是高压均质破碎还是超声破碎的?
第三,发酵菌体发黑,是放置时间的问题还是收集后就有黑色?
第四,对于包涵体表达来说,菌体的质量控制比较重要,诱导时候的OD值以及诱导的时间都是至关重要的。当然培养基会对发酵产生影响。这些都是个人经验和观点。。。。
人生的三大悲剧:不知道选择,不坚持选择,不断选择!
2楼2014-06-12 13:46:52
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