应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求问蛋白电泳？？！！！！！！
101/1返回列表
查看: 1307  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dreamchen

新虫 (初入文坛)

[求助] 求问蛋白电泳？？！！！！！！ 已有6人参与

做的15%的分离胶，marker条带很清晰，但是样品要么看不到 要么特别轻有一点点

样品大概40k~20k
求问哪里有问题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-27 14:26:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用溴酚蓝试着染一下胶，如果没有的话，就是蛋白提样出问题了
赞一下 回复此楼
2楼2014-03-27 14:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c_jade

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
marker条带清晰，是已经考染过了吗？
赞一下 回复此楼
3楼2014-03-27 15:17:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

开心YY

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般情况下，样品分子量在20~40k我们通常选择12%分离胶，还有可能你的蛋白样品浓度比较低，建议浓缩一下。
赞一下 回复此楼
每天给自己一个微笑
4楼2014-03-27 15:40:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1. 样品浓度过低，增加上样量。
2. 抗体稀释倍数过大，建议减少稀释倍数，特别是二抗的倍数。
3. 蛋白大小在20--40Kb,建议12%的分离胶。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-03-27 16:43:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dreamchen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by c_jade at 2014-03-27 15:17:12
marker条带清晰，是已经考染过了吗？

对 染过 marker很好  样品特别特别浅一点点
赞一下 回复此楼
6楼2014-03-27 19:30:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dreamchen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 开心YY at 2014-03-27 15:40:27
一般情况下，样品分子量在20~40k我们通常选择12%分离胶，还有可能你的蛋白样品浓度比较低，建议浓缩一下。

蛋白应该不到1mg/ml的样子
赞一下 回复此楼
7楼2014-03-27 19:31:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jmcookie

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by dreamchen at 2014-03-27 19:31:51
蛋白应该不到1mg/ml的样子...

不知道你的上样量是多少，可以试着做一个上样量梯度看看效果，如果是你的蛋白浓度的问题应该能够很清楚的反应出来
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-27 22:46:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c_jade

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dreamchen at 2014-03-27 19:30:46
对 染过 marker很好  样品特别特别浅一点点...

那肯定就是蛋白浓度的问题了。测得蛋白浓度是否准确，上样量是否偏少？
赞一下 回复此楼
9楼2014-03-28 09:19:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kinda_

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
9楼: Originally posted by c_jade at 2014-03-28 09:19:03
那肯定就是蛋白浓度的问题了。测得蛋白浓度是否准确，上样量是否偏少？...

楼主是在做WB？会不会是蛋白丰度低？或者抗体不行？跑胶应该是没什么问题的，不知道你的内参跑得怎么样？
赞一下 回复此楼
10楼2014-03-28 09:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dreamchen 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！ +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +10 枫桥ZL 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:02 by peike
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +14 曦熙兮 2026-03-15 14/700 2026-03-21 19:12 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂 +4 上岸6666@ 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:14 by 学员8dgXkO
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:38 by 学员8dgXkO
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭