应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求问蛋白电泳？？！！！！！！
101/1返回列表
查看: 1170  |  回复: 9
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dreamchen

新虫 (初入文坛)

[求助] 求问蛋白电泳？？！！！！！！已有6人参与

做的15%的分离胶，marker条带很清晰，但是样品要么看不到 要么特别轻有一点点

样品大概40k~20k
求问哪里有问题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2014-03-27 14:26:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用溴酚蓝试着染一下胶，如果没有的话，就是蛋白提样出问题了
赞一下 回复此楼
2楼2014-03-27 14:37:01
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c_jade

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
marker条带清晰，是已经考染过了吗？
赞一下 回复此楼
3楼2014-03-27 15:17:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

开心YY

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般情况下，样品分子量在20~40k我们通常选择12%分离胶，还有可能你的蛋白样品浓度比较低，建议浓缩一下。
赞一下 回复此楼
每天给自己一个微笑
4楼2014-03-27 15:40:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1. 样品浓度过低，增加上样量。
2. 抗体稀释倍数过大，建议减少稀释倍数，特别是二抗的倍数。
3. 蛋白大小在20--40Kb,建议12%的分离胶。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-03-27 16:43:34
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dreamchen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by c_jade at 2014-03-27 15:17:12
marker条带清晰，是已经考染过了吗？

对 染过 marker很好  样品特别特别浅一点点
赞一下 回复此楼
6楼2014-03-27 19:30:46
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dreamchen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 开心YY at 2014-03-27 15:40:27
一般情况下，样品分子量在20~40k我们通常选择12%分离胶，还有可能你的蛋白样品浓度比较低，建议浓缩一下。

蛋白应该不到1mg/ml的样子
赞一下 回复此楼
7楼2014-03-27 19:31:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jmcookie

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by dreamchen at 2014-03-27 19:31:51
蛋白应该不到1mg/ml的样子...

不知道你的上样量是多少，可以试着做一个上样量梯度看看效果，如果是你的蛋白浓度的问题应该能够很清楚的反应出来
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-27 22:46:18
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c_jade

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dreamchen at 2014-03-27 19:30:46
对 染过 marker很好  样品特别特别浅一点点...

那肯定就是蛋白浓度的问题了。测得蛋白浓度是否准确，上样量是否偏少？
赞一下 回复此楼
9楼2014-03-28 09:19:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kinda_

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
9楼: Originally posted by c_jade at 2014-03-28 09:19:03
那肯定就是蛋白浓度的问题了。测得蛋白浓度是否准确，上样量是否偏少？...

楼主是在做WB？会不会是蛋白丰度低？或者抗体不行？跑胶应该是没什么问题的，不知道你的内参跑得怎么样？
赞一下 回复此楼
10楼2014-03-28 09:39:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dreamchen 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭