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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR重复不出来啊，求助啊
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hihe99

银虫 (小有名气)

[求助] PCR重复不出来啊，求助啊 已有1人参与

先前p出来的东西，现在重做，总是p不出来。而且，按50配的体系，分成2管25，在同一个PCR仪上反应，一个有产物一个没有，做了几次了，都这样。如图。
是什么原因啊，该怎么办呢。急啊！！！！

PCR重复不出来啊，求助啊
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1楼 2014-03-23 21:57:23
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hihe99

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Jacob_24 at 2014-03-24 11:56:44
1，Mix是一样的话 那你确定没P出来的加Enzyme 了？
2，同一个PCR仪？
3，可以换个孔放 试试看
4，你的程序合理否？
5  可以尝试加DMSO 试试看

是先全配制好后再分装的，用的EX taq。
程序是普通的程序，先前也扩出来过
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3楼2014-03-25 19:50:16
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Jacob_24

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-24 13:33:31
hihe99: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-28 09:17:26
1，Mix是一样的话 那你确定没P出来的加Enzyme 了？
2，同一个PCR仪？
3，可以换个孔放 试试看
4，你的程序合理否？
5  可以尝试加DMSO 试试看
赞一下 回复此楼
CCC
2楼2014-03-24 10:56:44
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夏末忆雪

新虫 (初入文坛)
我也出现这种情况，2500bp，p出来两次，之后再也p不出来了，有时候也是两管平行，一管有一管没有，更换所有的试剂，其他人用着没问题，就是我p不出来，你有结论了吗？讨论一下
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4楼2014-04-03 15:54:03
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zeroon

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Jacob_24 at 2014-03-24 10:56:44
1，Mix是一样的话 那你确定没P出来的加Enzyme 了？
2，同一个PCR仪？
3，可以换个孔放 试试看
4，你的程序合理否？
5  可以尝试加DMSO 试试看

请问加DMSO是干嘛用的？谢谢
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5楼2014-04-03 16:42:29
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