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Yocan2012新虫 (小有名气)
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[求助]
植物基因组提取 已有4人参与
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最近在做植物基因组提取，用来测序建库使用的。使用的是植物（菊科）的种子作为材料，液氮研磨破碎，CTAB法提取，除了没有使用Tris饱和酚外，其他完全按照CTAB法进行操作。结果见图。此外，有时候提取到的只有250 bp大小的片段，有的时候根本什么也提取不到。但是，在年前做预实验的时候提取的效果是非常好的，20 kb的条带非常好。现在却怎么都重复不出来。求高人指点。 上图为现在的情况，下图为预实验提取的情况，所用maker均为Takara DL15000。  未标题-1.jpg  提取-1.png [ Last edited by Yocan2012 on 2014-3-18 at 13:18 ] |
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yipan 
铜虫 (职业作家)
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3楼2014-03-18 16:14:50
2楼2014-03-18 16:00:55
zhenwuhuang
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Yocan2012(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-19 16:06:09
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植物DNA的提取技术及注意事项 http://chinaaoju.blog.163.com/bl ... 961201211136154169/ |
4楼2014-03-18 16:33:00
花雨sky
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用不用tris饱和酚问题不是很大，我没有用也还是提出来了 1、药品有没有问题 2、研磨是否充分，这个很关键，如果研磨不充分的话，就得不到CTAB-核酸复合物，自然就看不到DNA了 3、浸提、抽提等各个步骤的动作一定要温和。 这有个经验总结，希望能对你有帮助http://huanansu211.blog.163.com/ ... 544720105291551541/ |
5楼2014-03-18 16:38:54
