应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 如何实现质粒的稳定转染？
51/1返回列表
查看: 3965  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

flybirdfly

木虫 (正式写手)

奋斗者

[求助] 如何实现质粒的稳定转染？已有4人参与

小虫现需要将一仅带有氨苄西林霉素基因的质粒稳定转染293T细胞，不知使用何种方法。有文献中是这样做的：将该质粒与pCDNA3以4:1的比例共转染（因为pCDNA3中含有neomycin的基因），然后就可以用G418筛选出稳转的细胞株。另有人说建议用Linear Selection Marker，如Linear Puromycin Marker，使具有嘌呤霉素抗性，然后用抗性培养基多次筛选。我想问一下这两种方法哪个更靠谱一点？请各位虫友不吝赐教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
Your attitude, not your aptitude, will determine your altitude. 努力！奋斗！
1楼2014-03-17 10:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星期天我放风
6楼2014-03-18 21:20:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
共转pCDNA 3.1是可以的，原则上pCDNA 3.1转染进了，你的目的基因也应该转染了，第二种没做过，但是也是用抗性筛选的吧
赞一下 回复此楼
2楼2014-03-17 12:21:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weskerZXC

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看看质粒的真核筛选基因，一般是neo抗性就用G418筛选
赞一下 回复此楼
3楼2014-03-18 10:25:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c_jade

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
都可以，以前实验室常用G418，效果不错。
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-18 14:19:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭