应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 细菌的RT-PCR求助
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1620  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

燕归来0101

银虫 (初入文坛)

[求助] 细菌的RT-PCR求助 已有2人参与

大家好，我想用荧光定量PCR对某种细菌进行定量，现在有该细菌基因组上的一段DNA序列（600bp）,和一对能扩增出这段序列中156bp片段的特异性引物，由于之前没接触过RT-PCR，想请教大家该如何进行，怎样才能对我的细菌进行定量？需要购买哪些什么试剂、试剂盒的？RT-PCR仪器学院里有。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-12 21:30:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕归来0101

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-12 21:41:56
试剂一般用SYBR Green（Roche，TAKARA），耗材需要专门的耗材跟仪器相关，你需要设计定量引物一般用软件设计要求较高，引物需要先得到扩增效率。选择好的扩增效率的引物再进行定量。网上有很多关于定量的文件你可以 ...

谢谢，我的引物用普通PCR验证，效果不错，特异性也强，其他细菌做对照都没有条带。荧光定量PCR是不是也可以直接用基因组DNA或者菌液做模板呢？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-03-13 16:55:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-03-13 08:40:31
燕归来0101: 金币+10, ★有帮助 2014-03-14 12:02:10
试剂一般用SYBR Green（Roche，TAKARA），耗材需要专门的耗材跟仪器相关，你需要设计定量引物一般用软件设计要求较高，引物需要先得到扩增效率。选择好的扩增效率的引物再进行定量。网上有很多关于定量的文件你可以看看。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

燕归来0101
hehe
2楼2014-03-12 21:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
燕归来0101(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-13 18:44:22
燕归来0101: 金币+9, ★有帮助 2014-03-14 12:02:21
楼主对细菌进行定量，很少有用荧光定量的啊，一般流式细胞仪就可以，以前见过文献对病毒进行绝对定量的，对细菌进行定量还是第一次。RT-PCR用普通的PCR仪器就可进行，不难，但是需要RT-PCR试剂盒。
赞一下 回复此楼
没有比脚更长的路，没有比人更高的山
3楼2014-03-13 10:11:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕归来0101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 若溪 at 2014-03-13 10:11:21
楼主对细菌进行定量，很少有用荧光定量的啊，一般流式细胞仪就可以，以前见过文献对病毒进行绝对定量的，对细菌进行定量还是第一次。RT-PCR用普通的PCR仪器就可进行，不难，但是需要RT-PCR试剂盒。

我是要对一种植物病原菌进行定量的，如果单一对这种纯培养的菌定量当然办法很多，但是土壤和植物组织中也有别的菌干扰啊，所以想用特异性的分子方法。
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-13 16:52:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +11 ioodiiij 2026-04-08 11/550 2026-04-08 16:48 by tjzhao
[考研] 347材料专硕求调剂 +18 zj8215216 2026-04-06 18/900 2026-04-08 16:27 by luoyongfeng
[考研] 085600材料与化工301分求调剂院校 +27 刺痛jk 2026-04-06 28/1400 2026-04-08 16:16 by luoyongfeng
[考研] 266求调剂 +4 08电气工程 2026-04-03 4/200 2026-04-08 15:57 by 向9755
[考研] 化学308分求调剂 +18 你好明天你好 2026-04-07 20/1000 2026-04-08 14:51 by screening
[考研] 080100力学316求调剂 +3 L_Hairui 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:26 by JourneyLucky
[考研] 农学，求调剂，314分 +4 访客记录可爱 2026-04-04 4/200 2026-04-07 21:07 by 等岸
[考博] 博士申请 +3 IQwQl 2026-04-05 3/150 2026-04-07 20:31 by greychen00
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 一志愿北京2，材料与化工308求调剂 +16 熊二想上岸 2026-04-04 17/850 2026-04-07 14:58 by BruceLiu320
[考研] 第一志愿东南大学物理313，有科研竞赛获奖经历，希望物理复试调剂 +3 马内橙 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:32 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +5 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 10:13 by 蓝云思雨
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-03 4/200 2026-04-04 22:17 by hemengdong
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 278求调剂 +3 依旧！ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 20:27 by 蓝云思雨
[考研] 331求调剂 +3 niby 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:56 by 蓝云思雨
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 262求调剂 +6 励志一定发文章 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:54 by linyelide
[考研] 一志愿北京科技材料科学与工程288分，求调剂 +14 是辰啊 2026-04-02 14/700 2026-04-02 21:10 by dongzh2009
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭