应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 细菌的RT-PCR求助
71/1返回列表
查看: 1595  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

燕归来0101

银虫 (初入文坛)

[求助] 细菌的RT-PCR求助 已有2人参与

大家好，我想用荧光定量PCR对某种细菌进行定量，现在有该细菌基因组上的一段DNA序列（600bp）,和一对能扩增出这段序列中156bp片段的特异性引物，由于之前没接触过RT-PCR，想请教大家该如何进行，怎样才能对我的细菌进行定量？需要购买哪些什么试剂、试剂盒的？RT-PCR仪器学院里有。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-12 21:30:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-03-13 08:40:31
燕归来0101: 金币+10, ★有帮助 2014-03-14 12:02:10
试剂一般用SYBR Green（Roche，TAKARA），耗材需要专门的耗材跟仪器相关，你需要设计定量引物一般用软件设计要求较高，引物需要先得到扩增效率。选择好的扩增效率的引物再进行定量。网上有很多关于定量的文件你可以看看。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

燕归来0101
hehe
2楼2014-03-12 21:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
燕归来0101(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-13 18:44:22
燕归来0101: 金币+9, ★有帮助 2014-03-14 12:02:21
楼主对细菌进行定量，很少有用荧光定量的啊，一般流式细胞仪就可以，以前见过文献对病毒进行绝对定量的，对细菌进行定量还是第一次。RT-PCR用普通的PCR仪器就可进行，不难，但是需要RT-PCR试剂盒。
赞一下 回复此楼
没有比脚更长的路，没有比人更高的山
3楼2014-03-13 10:11:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕归来0101

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 若溪 at 2014-03-13 10:11:21
楼主对细菌进行定量，很少有用荧光定量的啊，一般流式细胞仪就可以，以前见过文献对病毒进行绝对定量的，对细菌进行定量还是第一次。RT-PCR用普通的PCR仪器就可进行，不难，但是需要RT-PCR试剂盒。

我是要对一种植物病原菌进行定量的，如果单一对这种纯培养的菌定量当然办法很多，但是土壤和植物组织中也有别的菌干扰啊，所以想用特异性的分子方法。
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-13 16:52:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕归来0101

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-12 21:41:56
试剂一般用SYBR Green（Roche，TAKARA），耗材需要专门的耗材跟仪器相关，你需要设计定量引物一般用软件设计要求较高，引物需要先得到扩增效率。选择好的扩增效率的引物再进行定量。网上有很多关于定量的文件你可以 ...

谢谢，我的引物用普通PCR验证，效果不错，特异性也强，其他细菌做对照都没有条带。荧光定量PCR是不是也可以直接用基因组DNA或者菌液做模板呢？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-03-13 16:55:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小佳佳佳佳

新虫 (初入文坛)
有没有做细菌PCR做出结果的，在下需要一个预期的结果和分析。哪位大神可以参考下。
或者给个论文链接看看
赞一下 回复此楼
6楼2014-12-04 15:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小佳佳佳佳

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 燕归来0101 at 2014-03-13 16:55:11
谢谢，我的引物用普通PCR验证，效果不错，特异性也强，其他细菌做对照都没有条带。荧光定量PCR是不是也可以直接用基因组DNA或者菌液做模板呢？...

有没有做细菌PCR做出结果的，在下需要一个预期的结果和分析。哪位大神可以参考下。
或者给个论文链接看看
赞一下 回复此楼
7楼2014-12-04 15:55:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 燕归来0101 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +8 llllkkkhh 2026-03-18 8/400 2026-03-18 21:01 by Catalysis25
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +8 SUICHILD 2026-03-12 8/400 2026-03-18 20:55 by winsuccess
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +9 秋有木北 2026-03-14 9/450 2026-03-18 19:49 by macy2011
[考研] 0703化学调剂 +7 妮妮ninicgb 2026-03-15 11/550 2026-03-18 19:48 by macy2011
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭