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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物稀释
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR产物稀释 已有5人参与

各位虫友，我想用得到的PCR产物用于下一步PCR的模板，但测了一下浓度太高，在1500ng/ul左右，但我下一步的PCR希望模板的浓度能在2ng/ul左右，这样稀释的倍数就很高，大家有什么好的稀释办法，分享一下吧  谢谢
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1楼 2014-03-10 17:32:36
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-10 19:02:54
摩羯的心: 金币+1 2014-03-11 17:15:42
一般这种倍数很多的情况，多数采用梯度稀释来解决一步稀释不准的问题。
比如先稀释10倍，再取稀释液稀释10倍，。。。以此类推。
希望对你有帮助。
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2楼2014-03-10 18:16:18
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晶晶梁

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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摩羯的心: 金币+1 2014-03-11 17:14:37
取一微升原液加750微升的水，我只想到这个了
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3楼2014-03-10 18:18:27
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-11 13:37:15
摩羯的心: 金币+1 2014-03-11 17:14:46
不用这么精准，我们一般是把PCR产物稀释1000倍或10000倍再做模板，取一微升加入999微升水震荡混匀就没问题了。
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hehe
4楼2014-03-10 21:58:00
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shengwumin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-11 13:37:00
摩羯的心: 金币+1 2014-03-11 17:15:01
梯度稀释是最好 的办法。祝福楼主好运。其实下一轮PCR，你的模版浓度是不是有点低了？我们一般是100ng/ul
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believeyourself! come on .
5楼2014-03-11 10:02:09
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2651zbh

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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摩羯的心: 金币+1 2014-03-11 17:15:08
加缓冲液稀释呗，10倍稀释，100倍，1000倍
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没有做不到的，只有想不到的！
6楼2014-03-11 10:41:12
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