| 查看: 14004 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
融合PCR详细步骤 已有3人参与
|
||
| 请问怎么做融合PCR（重叠延伸PCR），请列出详细步骤，万分感谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有67人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 急求荧光实时定量PCR内参法实验步骤，最好能给我一篇详细点的论文
已经有14人回复
- 【分享】聚合酶链反应（PCR)技术 动画
已经有123人回复
- 怎么做融合蛋白？
已经有14人回复
- 融合PCR最后一步做不出来，求救！！！
已经有23人回复
- 有没有关于植物RT-PCR的详细步骤
已经有4人回复
- 求助具体的（具体的）无连接酶亚克隆法全步骤，从PCR到克隆
已经有13人回复
- 一种比较详细的PCR技术
已经有10人回复
- 重叠延伸PCR引物合成求助
已经有15人回复
- 关于融合PCR的问题
已经有14人回复
- overlap PCR做不出来呐。。。。
已经有23人回复
- 重叠PCR应该怎么做？
已经有9人回复
- 如何设计重叠延伸PCR引物
已经有14人回复
- 融合pcr怎么总是不成功啊
已经有9人回复
- 【求助/交流】请教个关于inverse PCR的问题
已经有21人回复
- 【求助/交流】关于pcr内参b-actine的一个问题
已经有5人回复
- 半定量PCR的详细步骤
已经有7人回复
- 【求助/交流】菌液PCR的经验
已经有6人回复
- 【转帖】PCR技术详细步骤－从RNA抽提到电泳鉴定
已经有67人回复
- 详细图解：实时定量PCR引物和探针设计操作步骤
已经有31人回复
- 生物信息学专题－生物版，医学版和信息科学版共同创建
已经有87人回复
lwk5716
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 6993.4
- 散金: 181
- 红花: 3
- 帖子: 412
- 在线: 92.7小时
- 虫号: 2628224
- 注册: 2013-09-01
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
7楼2015-11-08 22:09:30
shiyiyaya
金虫 (正式写手)
- 应助: 36 (小学生)
- 金币: 1276.4
- 散金: 279
- 红花: 8
- 帖子: 301
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 871992
- 注册: 2009-10-14
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-03-02 15:46:04
jza63: 金币+10 2014-03-14 16:06:39
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-03-02 15:46:04
jza63: 金币+10 2014-03-14 16:06:39
|
好，来相助一把。 在重叠的一段设计一对完全互补的引物（P1-Reverse和P2-Forward）。 1. 使用引物P1-Forward，P1-Reverse扩增片段Segment1；使用引物P2-Forward，P2-Reverse扩增片段Segment2. 2. 取一些第一轮PCR产物（5ul/25ul即可），重新加入Taq酶和dNTPs，buffer等，延伸一轮，15min左右。 3. 加入P1-Forward和P2-Reverse，进行第二轮PCR。 4.产物回收。 应该可以，具体细节根据你的引物和片段来定。 |
2楼2014-03-01 21:27:47
3楼2014-03-02 20:01:57
lvbobo823
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 363 (硕士)
- 金币: 7753.3
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 751
- 在线: 189.4小时
- 虫号: 819723
- 注册: 2009-07-31
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
4楼2014-03-02 20:43:28
