应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 如何设计点突变引物？
151/2返回列表12下一页
查看: 14402  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huangwy927

银虫 (初入文坛)

[求助] 如何设计点突变引物？ 已有5人参与

有详细步骤最好！万分感谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-08 20:49:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
huangwy927: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-02-11 13:25:18
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-13 19:14:30
设计点突变引物除了遵循一般引物设计规则外，需要注意以下几点:1）引物长度25-45bp，以突变碱基为中心设计。2）Tm值在78左右。GC含量大于40%。
赞一下(2人) 回复此楼
hehe
4楼2014-02-10 10:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

454051918

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-13 19:14:38
你可以看这个说明书来设计突变引物
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : easymutagenesissystem.pdf
    • 2014-02-13 16:52:13, 617.48 K
6楼2014-02-13 16:52:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

454051918

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
huangwy927: 金币+2, ★有帮助 2014-03-04 10:00:37
引用回帖:
5楼: Originally posted by huangwy927 at 2014-02-11 13:25:03
引物：上游 CAGTCACCCATAAAGCAGAAAGCACT
      下游 CCTAGGCACGTCAGTGGGTATTTCG
如何得知引物退火温度？以上为例...

这个引物的退火温度是要在引物设计软件如Oligo 6或者Primer Premier 5里看的，在引物设计软件里打开目的序列，然后设计引物，然后就可以看到你设计的引物的各项参数，包括退火温度
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-02-13 16:57:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lippi21

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-13 19:14:57
刚做过，直接给给网站吧！
http://www.bioinformatics.org/primerx/cgi-bin/DNA_1.cgi
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2014-02-13 17:47:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这个问题问得很搞笑，直接合成，就突变了，想怎么突变怎么突变。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2014-03-02 23:23:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangwy927

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 454051918 at 2014-02-13 16:52:51
你可以看这个说明书来设计突变引物

你用的试剂盒体系是？要摸退火温度嘛？
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2014-03-03 17:07:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-02-09 12:05:40
huangwy927: 金币+1, ★有帮助 2014-02-09 16:49:31
网上都可以搜到方法的，一般我们用定点引物突变，想把哪个位点突变，直接设计一个突变引物就可以了，很方便，也做过缺失突变的，都能达到效果！
赞一下 回复此楼
寻找真正的自我！
2楼2014-02-09 10:20:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangwy927

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lhs521521 at 2014-02-09 10:20:07
网上都可以搜到方法的，一般我们用定点引物突变，想把哪个位点突变，直接设计一个突变引物就可以了，很方便，也做过缺失突变的，都能达到效果！

能举个例子嘛？定点突变引物如何设计？
赞一下 回复此楼
3楼2014-02-09 16:20:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangwy927

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-02-10 10:44:55
设计点突变引物除了遵循一般引物设计规则外，需要注意以下几点:1）引物长度25-45bp，以突变碱基为中心设计。2）Tm值在78左右。GC含量大于40%。

引物：上游 CAGTCACCCATAAAGCAGAAAGCACT
      下游 CCTAGGCACGTCAGTGGGTATTTCG
如何得知引物退火温度？以上为例
赞一下 回复此楼
5楼2014-02-11 13:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangwy927

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lippi21 at 2014-02-13 17:47:19
刚做过，直接给给网站吧！
http://www.bioinformatics.org/primerx/cgi-bin/DNA_1.cgi

打不开
回复此楼
9楼2014-03-02 20:55:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huangwy927 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +9 majunge000 2026-08-11 11/550 2026-08-15 23:20 by botar
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭