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ygdeying_11铁虫 (小有名气)
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求助：两种蛋白融合原核表达的问题 已有2人参与
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小弟采用BL21、质粒pet28a进行原核表达。将A，B两种基因串联在一起，形成“A-linker-B”。 原核诱导后，考马斯亮蓝染色显示，目的大小处有条带，且用His标签进行Western Blot可显出目的蛋白。 但是当我用B蛋白的抗体做Western时，却显不出条带，我不太理解，请各位大牛给些指点。 有人说可能A-B在一起后影响了B的结构，但是Western样品是煮沸变性的，应该只有线性的一级结构了吧，那为什么抗体可以显出变性的B，却显不出变性的A-B？ |
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jiaolong11a
新虫 (小有名气)
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8楼2014-02-13 09:08:50