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baronwhy

木虫 (小有名气)

[求助] 新人求助关于基因共表达的一个问题! 已有1人参与

现在准备做基因的共表达,查文献看到的共表达分两类,一类是多顺反子表达系统,另一类是双质粒表达系统。多顺反子表达系统包括多启动子表达系统和单启动子表达系统,我准备做单启动子的共表达。
    问题是文献所查的基因共表达基本都是融合表达,就是前一个基因产物和后一个基因产物间通过连接肽连接。而我不想进行融合表达,我的设想是在两个结构基因均保留起始密码子和终止密码子,而两基因间的连接序列含有RBS,序列结构如下:

                 ATG-基因1-终止密码子1-RBS2-ATG-基因2-终止密码子2

    这样插入表达载体后,基因1为正常表达,至终止密码子1结束,而基因2的表达由RBS2处结合核糖体开始翻译。
    不知这种设计行不行?因为没有查到有这么表达方式的文献!
    不知道是不是这个问题原因太简单了,所以没有提到,我查了好久没查到原因
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WilliamHJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
baronwhy: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-15 08:56:13
你的设计从理论上是可行的,不过第二个RBS位点的效率可能会受到影响,翻译效率并不高。另外如果基因过长的话,转录过程中也难免有转录残缺的情况发生,就是后面的片段没有完全转录,这样也会导致第二个基因的表达效率比较低。具体情况请参考http://muchong.com/html/201308/6287731.html
这个帖子里有位仁兄回答比较仔细,也提供了几篇参考文献
学习中
3楼2015-06-14 19:52:08
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baronwhy

木虫 (小有名气)

2楼2014-01-09 09:41:46
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