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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE，条带压缩不好，溶液全部重配还是不好。
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huangyan0517

金虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE，条带压缩不好，溶液全部重配还是不好。

大分子的条带还可以，但是小分子量的颜色很浅，但是跑电泳时溴酚蓝的指示前沿没有跑出胶外，所以蛋白应该也没有跑出胶的范围。求高人解答。
SDS-PAGE，条带压缩不好，溶液全部重配还是不好。
这个是原来比较好的时候，底部的蛋白还大致能跑出来


SDS-PAGE，条带压缩不好，溶液全部重配还是不好。-1
这个是后来的，底部的条带就分散的不好了


SDS-PAGE，条带压缩不好，溶液全部重配还是不好。-2
这个是今天跑电泳时拍的，有个泳道的有一条好像渗漏的线，谁能告诉我原因在哪？


SDS-PAGE，条带压缩不好，溶液全部重配还是不好。-3
电泳跑完后的溴酚蓝指示剂，压得不好，原因在哪？pH吗


SDS-PAGE，条带压缩不好，溶液全部重配还是不好。-4
最新跑的，脱完色之后底部的条带更分不清拉
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1楼 2013-12-29 19:16:00
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huangyan0517

金虫 (小有名气)
鄙视那些赚金币的
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13楼2013-12-30 11:59:49
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-30 08:23:47
我觉得你的胶压缩得还算是可以的，主要是样品的上样量不合适，可能某些样品里的盐浓度过高，所以带型不漂亮。至于浓缩胶渗漏的原因可能是胶与玻璃板之间有微小空隙。这可能是玻璃板未洗净或者是梳子的厚度稍微大了一点点（这个不是你的错）。如果是后者，可以灌入分离胶后把梳子插在两块玻璃板之间。
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12楼2013-12-30 03:23:03
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hxclgs

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得有可能是样品的问题。
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14楼2014-01-24 10:11:12
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fuyuandj86

版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
亲,你这是不是15%以上的胶啊,
根据本人多年经验 15%以上的胶就这尿性, 有时候好有时候坏
而且我猜你要看的条带分子量小于15kDa
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15楼2014-01-24 11:29:30
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老liao

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
第二张图分离胶部分好像聚合得不好，还是胶做好后放久了？建议你加大上样量再跑跑。
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16楼2014-01-24 13:15:30
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huangyan0517

金虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-01-24 11:29:30
亲,你这是不是15%以上的胶啊,
根据本人多年经验 15%以上的胶就这尿性, 有时候好有时候坏
而且我猜你要看的条带分子量小于15kDa

高人！有改善方法没，难道只能看人品？
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17楼2014-03-10 15:30:07
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宋全伟2楼
2013-12-29 19:28   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
， [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
dtfdu3楼
2013-12-29 19:30   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
lefantian1224楼
2013-12-29 19:34   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
天涯20125楼
2013-12-29 19:40   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
miaojiabing6楼
2013-12-29 19:42   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
数星星的小子7楼
2013-12-29 19:43   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
laom20138楼
2013-12-29 19:44   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
chenyh7189楼
2013-12-29 19:45   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
林川10楼
2013-12-29 19:52   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
yingying158811楼
2013-12-29 23:00   回复  
huangyan0517(金币+1): 谢谢参与
樱雪诺风18楼
2014-03-25 16:32   回复  
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