Originally posted by 晴空Alex at 2011-07-23 14:04:24:
我用全细胞跑出来的条带比较清晰，用提纯的蛋白跑出来的条带反而很模糊，我问问可以进行怎样的改进？我用的材料是蓝藻细胞！
全细胞电泳

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Originally posted by psh2009 at 2011-07-23 14:40:51:
我以前也做过类似的，也是蓝藻的，你能不能把你电泳条件说一下呢？比如分离胶和浓缩胶的浓度？电流电压？

Originally posted by 晴空Alex at 2011-07-23 22:40:24:
分离胶的浓度是10%，浓缩胶3%，电流20mA电压120v，蛋白样品是用乙醇沉淀法从溶液中沉淀出来，然后去上清，加上样缓冲液煮沸5min。在点样前先5000g离心1min，然后取上清液进行点样。跪求老兄帮忙！！！

Originally posted by psh2009 at 2011-07-24 04:08:27:
嗯，10%的分离胶应该也行，我用的12%的，从第二个图里我觉得你点样浓度有点太高吧，你从细胞里把蛋白沉淀出来，是不是相当于浓缩了？具体操作我不清楚，建议点样量减半试一试

Originally posted by 晴空Alex at 2011-07-24 09:30:59:
好的，我试试哈。另外网上说我的情况有可能是样品在电泳过程中反复沉降与溶解导致了拖尾，你觉得有什么解决办法吗？