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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE跑出来的条带不清晰
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晴空Alex

铜虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE跑出来的条带不清晰

我用全细胞跑出来的条带比较清晰，用提纯的蛋白跑出来的条带反而很模糊，我问问可以进行怎样的改进？我用的材料是蓝藻细胞！
全细胞电泳

提取蛋白电泳

[ Last edited by 晴空Alex on 2011-7-23 at 14:05 ]
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多读文献少睡觉
1楼 2011-07-23 14:04:24
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晴空Alex

铜虫 (初入文坛)
dhd997: 可以引用回复 2011-07-24 09:11:07
分离胶的浓度是10%，浓缩胶3%，电流20mA电压120v，蛋白样品是用乙醇沉淀法从溶液中沉淀出来，然后去上清，加上样缓冲液煮沸5min。在点样前先5000g离心1min，然后取上清液进行点样。跪求老兄帮忙！！！
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多读文献少睡觉
3楼2011-07-23 22:38:17
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psh2009

金虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-07-23 17:15:38
我以前也做过类似的，也是蓝藻的，你能不能把你电泳条件说一下呢？比如分离胶和浓缩胶的浓度？电流电压？
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书山有路勤为径，学海无涯苦作舟！
2楼2011-07-23 14:40:51
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晴空Alex

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 晴空Alex at 2011-07-23 14:04:24:
我用全细胞跑出来的条带比较清晰，用提纯的蛋白跑出来的条带反而很模糊，我问问可以进行怎样的改进？我用的材料是蓝藻细胞！
全细胞电泳

[eimg]2a/bc/1119540_ ...

分离胶的浓度是10%，浓缩胶3%，电流20mA电压120v，蛋白样品是用乙醇沉淀法从溶液中沉淀出来，然后去上清，加上样缓冲液煮沸5min。在点样前先5000g离心1min，然后取上清液进行点样。跪求老兄帮忙！！！
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多读文献少睡觉
4楼2011-07-23 22:39:29
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晴空Alex

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by psh2009 at 2011-07-23 14:40:51:
我以前也做过类似的，也是蓝藻的，你能不能把你电泳条件说一下呢？比如分离胶和浓缩胶的浓度？电流电压？

分离胶的浓度是10%，浓缩胶3%，电流20mA电压120v，蛋白样品是用乙醇沉淀法从溶液中沉淀出来，然后去上清，加上样缓冲液煮沸5min。在点样前先5000g离心1min，然后取上清液进行点样。跪求老兄帮忙！！！
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多读文献少睡觉
5楼2011-07-23 22:40:24
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