应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE跑出来的条带不清晰
51/1返回列表
查看: 1588  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

晴空Alex

铜虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE跑出来的条带不清晰

我用全细胞跑出来的条带比较清晰，用提纯的蛋白跑出来的条带反而很模糊，我问问可以进行怎样的改进？我用的材料是蓝藻细胞！
全细胞电泳

提取蛋白电泳

[ Last edited by 晴空Alex on 2011-7-23 at 14:05 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
多读文献少睡觉
1楼 2011-07-23 14:04:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴空Alex

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by psh2009 at 2011-07-24 04:08:27:
嗯，10%的分离胶应该也行，我用的12%的，从第二个图里我觉得你点样浓度有点太高吧，你从细胞里把蛋白沉淀出来，是不是相当于浓缩了？具体操作我不清楚，建议点样量减半试一试

好的，我试试哈。另外网上说我的情况有可能是样品在电泳过程中反复沉降与溶解导致了拖尾，你觉得有什么解决办法吗？
赞一下 回复此楼
多读文献少睡觉
7楼2011-07-24 09:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

psh2009

金虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-07-23 17:15:38
我以前也做过类似的，也是蓝藻的，你能不能把你电泳条件说一下呢？比如分离胶和浓缩胶的浓度？电流电压？
赞一下(1人) 回复此楼
书山有路勤为径，学海无涯苦作舟！
2楼2011-07-23 14:40:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴空Alex

铜虫 (初入文坛)
dhd997: 可以引用回复 2011-07-24 09:11:07
分离胶的浓度是10%，浓缩胶3%，电流20mA电压120v，蛋白样品是用乙醇沉淀法从溶液中沉淀出来，然后去上清，加上样缓冲液煮沸5min。在点样前先5000g离心1min，然后取上清液进行点样。跪求老兄帮忙！！！
赞一下(1人) 回复此楼
多读文献少睡觉
3楼2011-07-23 22:38:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴空Alex

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 晴空Alex at 2011-07-23 14:04:24:
我用全细胞跑出来的条带比较清晰，用提纯的蛋白跑出来的条带反而很模糊，我问问可以进行怎样的改进？我用的材料是蓝藻细胞！
全细胞电泳

[eimg]2a/bc/1119540_ ...

分离胶的浓度是10%，浓缩胶3%，电流20mA电压120v，蛋白样品是用乙醇沉淀法从溶液中沉淀出来，然后去上清，加上样缓冲液煮沸5min。在点样前先5000g离心1min，然后取上清液进行点样。跪求老兄帮忙！！！
赞一下 回复此楼
多读文献少睡觉
4楼2011-07-23 22:39:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭