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湖畔狂想

金虫 (小有名气)

[求助] 双酶切图片,不知道切没切开,求指教。 已有4人参与

酶切的表达载体
左一是15000marker,左二、左三都是酶切的图片,右一是没有酶切的质粒。


现在遇到的问题就是酶切的第一条带比质粒的第一条带略高;而酶切的第二条带比质粒的第二条带略低。
我感觉是切成功了,但是没有切完全。
理由如下:1、酶切的第二条带亮度大约是质粒两条带亮度的和。
                 2、位置略低,与之前实验室做过酶切的位置很像。

希望大家多提意见,非常感谢!
双酶切图片,不知道切没切开,求指教。
表达载体酶切atpG-2013.12.28.JPG
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意萧02

木虫 (正式写手)

楼主还是很牛的,好好加油,必能成功
9楼2013-12-31 09:23:48
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-28 21:03:49
你的酶切是只把载体切成线性还是会切下一段小片段?最好再加上以分别单酶切做对照。
2楼2013-12-28 15:43:52
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-28 21:03:57
首先建议你把胶跑时间再长些,另外你酶切之后片段大小是多少?单看你的图片像是被切开。
hehe
3楼2013-12-28 15:47:21
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luwei13566

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-29 16:08:28
你的质粒要有多大啊?建议你用0.8%——1%的琼脂糖电泳~~~你的Marker是什么?你点的这个marker对你这个质粒没有指示作用~~,建议用handIII做marker
大家相互帮助哈
4楼2013-12-28 23:02:17
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