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windleakey金虫 (小有名气)
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[求助]
PGEX-6P-1 载体构建 求帮忙
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情况是这样的，有个老师设计好的引物给我，让我克隆表达一个蛋白。我构建好几个载体准备开始表达，回头看发现下游引物有点问题。结果导致克隆进载体的目的基因的碱基数不是3的倍数，多出了一个碱基。也就是说向下移码了一位。 想请问大神们，这样还能做表达吗？这关系到我是继续往下做western还是重头开始。 我用重组PGEX-6P-1质粒SDS-PAGE发现很像蛋白表达出来了。 我在PGEX-6P-1多克隆位点下游发现这样的序列TGA C TGA C TGA，连续三个终止密码子，这是不是代表就算移码也没关系，我的蛋白有可能表达呢？ |
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