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3‘race的怪异现象
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| 最近做了一个月的3’race，跌跌撞撞，一直栽在同一个问题上。第一次用GSP扩增出大概有200bp的条带，连接T载体后转化测序，只得到大概130bp的片段，后面有22个A，A后面接着3‘接头；A前面的碱基序列都是对的，也就是CAAGGGCTGCCTTAGCTGTCAAGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA，无终止密码，而且CDS也应该还差十几个碱基。我重新设了引物再一次做，怪异的现象出来了，出来的后面序列也是一模一样，就是一到CAAGGGCTGCCTTAGCTGTCAAGAA就直接出现POLY a了。GAA后面的几个氨基酸死活出不来，那POLY A是怎么出来的呀！！！！！两次都有做过巢式，测序到GAA也是没有后面的几个碱基。这是为什么呀~~~求助~~~研一的孩子对实验都没热情了。。。。 |
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 RACE |
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