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xdfy0301

新虫 (初入文坛)

[求助] 定点突变蛋白质不表达 已有1人参与

近期,做了几个点的定点突变,突变点是通过软件模拟得到的。通过突变,转化发酵,结果突变体没有酶活。突变体DNA测序表明突变正确,没有移码。但未能找到不表达的原因,向各位求助,指点一下何种原因导致不表达,谢谢。
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w_goodluck

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xdfy0301 at 2013-12-06 11:05:09
你是针对其什么特性做的突变...

是我们之前发现这个基因发生的某个突变导致了菌株成为了营养缺陷型(应该是该酶失活了)。做的就是这个基因突变,没有做过相应的分析。
9楼2013-12-06 11:52:25
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查看全部 14 个回答

zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-23 01:23:52
xdfy0301: 金币+2 2013-11-24 20:09:55
定点突变蛋白质不表达和结果突变体没有酶活不是一回事吧,你的蛋白是否表达呢,做个western看看
2楼2013-11-22 20:40:22
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xdfy0301

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zh10246 at 2013-11-22 20:40:22
定点突变蛋白质不表达和结果突变体没有酶活不是一回事吧,你的蛋白是否表达呢,做个western看看

跑过SDS变性电泳,没有目的条带(正常目的条带很粗)因此,推测为没有表达
3楼2013-11-23 16:31:26
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南子枫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xdfy0301: 金币+1 2013-11-24 20:10:03
难道是你突变的位点对表达有重要作用?
RT-PCR看看有没有转录活性如何?
4楼2013-11-23 19:31:00
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