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铁杆木虫 (著名写手)

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[交流] 当得到一条基因不能做表达的时候应该做些什么已有6人参与

现在手头在做的一个基因，但是不能做表达，得到这个基因还可以从哪些地方入手啊，请高手指点

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1楼2012-04-28 09:10:33

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凌波丽

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhaohq1209: 金币+5, BioEPI+1, 高手~ 2012-04-29 09:42:24

难表达的基因的另一个研究方法，研究它与蛋白质的相互作用，也就是研究DNA-Protein interaction。蛋白质-DNA的相互作用研究方法：EMSA，足迹法，干扰法，CHIP,DNA-蛋白质共结晶后X-ray diffraction,NMR,pull-down，光共振能量转移，电子晶体学，电子显微镜直接观测，全内反射荧光显微术(TIRFM)，原子力显微镜观测，化学或酶试剂对于蛋白质进行裂解确定蛋白质-DNA的相互作用位点确定，突变（定点突变，结构域转换等）与蛋白质再/去折叠对蛋白质-DNA的相互作用位点，低温冷冻电镜观测，蛋白质-DNA的相互作用的特异作用位点的化学交联等。
反正DNA片段要起作用，肯定要通过反式因子，不然它就只能影响本条染色体，巨大多数反式因子是蛋白质，我们不好表达一段基因，就分析它与什么样的蛋白质发生相互作用，来打开研究其功能的途径，参与基因表达调控本身也是一种重要的功能。还可以比较其结合的反式因子有什么具体特征，这本身就可挖掘到很多成果。进一步对比结合类似的反式因子的基因片段都有哪些类型，多数出现在那里，结合不同的反式因子对应细胞周期的时空关系。。。可以挖掘出很不少的成果，不是吗？

我记得去以前看本军事学书籍（一位俄罗斯坦克兵校官写的，我虽然是女生，但是对于军事学有些兴趣），里面有段话我至今觉得挺有道理：他批驳了关于坦克无用论的观点，理由：现代坦克的日子可不好过了，反坦克武器（反坦克导弹、加农炮、歼击轰炸机、武装直升机等）对于坦克杀伤力非常大，海湾战争和伊拉克战争都是明证，这是事实，但是坦克是进攻性武器，它可以选择攻击点，如果把多数反坦克武器集中于一处，那么坦克会简单地绕道而行，从其他地方进攻。许多时候，正面攻克困难不容易，不如避开它绕道而行。