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蓬鹏pinky

新虫 (初入文坛)

[求助] pET28载体做原核表达,表达蛋白比目的蛋白大20多kD

我用pET28a载体构建的原核表达载体,酶切位点用的EcoR1  Hind3,转入BL21诱导表达后,SDS-PAGE 检测  WESTERN结果诱导的蛋白比预算的目的蛋白大小要大几乎一倍,是哪里出了问题?测序结果载体序列连目的基因序列是完全正确的。
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

表达未完全终止,多表达了一段你不要的。
重新设计一下终止密码。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
3楼2013-11-22 11:03:05
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zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有没可能是二聚体呢
2楼2013-11-22 01:39:50
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kaojun2012

新虫 (小有名气)

您好,请问您的问题找到原因了吗
4楼2017-12-23 17:38:43
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