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蓬鹏pinky

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 5.5
帖子: 3
在线: 3.4小时
虫号: 2417788
注册: 2013-04-14
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] pET28载体做原核表达，表达蛋白比目的蛋白大20多kD

我用pET28a载体构建的原核表达载体，酶切位点用的EcoR1 Hind3，转入BL21诱导表达后，SDS-PAGE 检测 WESTERN结果诱导的蛋白比预算的目的蛋白大小要大几乎一倍，是哪里出了问题？测序结果载体序列连目的基因序列是完全正确的。

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1楼2013-11-21 21:48:04

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同东中郎将

新虫 (小有名气)

BioEPI: 1
应助: 29 (小学生)
金币: 318.1
帖子: 99
在线: 34.3小时
虫号: 2417234
注册: 2013-04-14
性别: GG
专业: 作物栽培与耕作学

表达未完全终止，多表达了一段你不要的。
重新设计一下终止密码。

曾子曰：“士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎？死而后已，不亦远乎？”

3楼2013-11-22 11:03:05

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zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

应助: 348 (大学生)
金币: 13497
散金: 115
红花: 47
帖子: 14588
在线: 878.6小时
虫号: 2786456
注册: 2013-11-08
专业: 细胞外基质

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

有没可能是二聚体呢

2楼2013-11-22 01:39:50

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kaojun2012

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 518.5
散金: 3
帖子: 91
在线: 22.4小时
虫号: 966694
注册: 2010-03-10
专业: 植物生理与生化

您好，请问您的问题找到原因了吗

4楼2017-12-23 17:38:43

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