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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 用胶跑的电泳实在没法看了
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fenfen53400

铁虫 (初入文坛)

[求助] 用胶跑的电泳实在没法看了

求大神指点啊？我用我提的蛋白跑电泳，发现没有明显条带，跑的地方全是阴影，但是测定蛋白浓度的时候又有浓度，不知道是怎么回事，希望大家给我指点一下啊，下面是我跑的电泳图
用胶跑的电泳实在没法看了
Administrator 2013-10-25 15hr 43min.jpg
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不留遗憾的走下去
1楼 2013-11-16 20:22:26
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helanfeifei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
除了标准蛋白那条，其他的都是你的样品吗？是什么蛋白啊？是平行的还是不同浓度的，你纯化了没？
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我就是我
2楼2013-11-17 10:47:05
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hujiasong

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的标准蛋白很不错的，后面的前4个浓度稍微有点差异，别的差别不是很大。你说下你的都是什么样品，什么浓度的
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3楼2013-11-17 17:59:40
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fenfen53400

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by helanfeifei at 2013-11-17 10:47:05
除了标准蛋白那条，其他的都是你的样品吗？是什么蛋白啊？是平行的还是不同浓度的，你纯化了没？

是胶原蛋白，经过热解后成为明胶了，不同批的提取样，浓度有点差别，浓度大概在0.1mg/ml
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不留遗憾的走下去
4楼2013-11-17 20:40:09
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fenfen53400

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hujiasong at 2013-11-17 17:59:40
你的标准蛋白很不错的，后面的前4个浓度稍微有点差异，别的差别不是很大。你说下你的都是什么样品，什么浓度的

不同批提取的蛋白，是胶原蛋白，经过热解后成为明胶了，浓度大概在0.1mg/ml
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不留遗憾的走下去
5楼2013-11-17 20:41:10
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fenfen53400

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hujiasong at 2013-11-17 17:59:40
你的标准蛋白很不错的，后面的前4个浓度稍微有点差异，别的差别不是很大。你说下你的都是什么样品，什么浓度的

还有一块是这样的
用胶跑的电泳实在没法看了-1
10% 第二块 2013-11-14 19hr 11min.jpg
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不留遗憾的走下去
6楼2013-11-17 21:02:06
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mome7

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你检查检查你是不是没处理好 处理时间长点呢  或者离心速度低了？
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一直坚强下去才会离幸福越来越近
7楼2013-11-17 21:35:15
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hujiasong

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by fenfen53400 at 2013-11-17 20:40:09
是胶原蛋白，经过热解后成为明胶了，不同批的提取样，浓度有点差别，浓度大概在0.1mg/ml...

你那个怎么会是白的，染色应该再处理下，你的标品条带已经出来，但是样品不清楚。还有可能的就是胶原蛋白的分子量比较分散或者非常大，标准蛋白的分子量中不含有。你的标准蛋白用的是什么分子量区间的。
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8楼2013-11-18 08:45:22
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helanfeifei

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fenfen53400 at 2013-11-17 20:40:09
是胶原蛋白，经过热解后成为明胶了，不同批的提取样，浓度有点差别，浓度大概在0.1mg/ml...

我也做过胶原蛋白，必须热解吗？我当时冻干的，但是不好溶解
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我就是我
9楼2013-11-18 12:08:52
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fenfen53400

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hujiasong at 2013-11-18 08:45:22
你那个怎么会是白的，染色应该再处理下，你的标品条带已经出来，但是样品不清楚。还有可能的就是胶原蛋白的分子量比较分散或者非常大，标准蛋白的分子量中不含有。你的标准蛋白用的是什么分子量区间的。...

标准蛋白分子量区间是10kDa-170kDa,白的那个地方是浓度比较低，最后那个孔是没有加蛋白
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不留遗憾的走下去
10楼2013-11-18 16:56:37
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