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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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kehan777

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] PCR产物凝胶电泳图

请问大家对这个图的PCR反应体系有什么建议吗?
拖带、有二聚体、目的条带不够亮..

其中一条:是该稍微减少模板量,还是增加?
PCR产物凝胶电泳图
3.png
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kehan777

兑换贵宾

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引用回帖:
2楼: Originally posted by yesucao at 2013-10-30 11:32:23
模板提取是不是不是很好啊?浓度低了,增加模板量试一下,反正到时候你切的是你的目的条带。

如果做PCR产物纯化,而不做胶回收,二聚体和拖带 会不会影响后面的双酶切?因为在双酶切之后,连接之前,我们会再做一次胶回收,但不知道上面所说的影响有多大..
6楼2013-10-31 21:55:18
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yesucao

专家顾问

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-10-30 21:00:35
kehan777: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-05 19:24:32
模板提取是不是不是很好啊?浓度低了,增加模板量试一下,反正到时候你切的是你的目的条带。
2楼2013-10-30 11:32:23
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wuyao0513

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-10-30 21:00:46
换引物吧,引物的影响很大的。。。好好的设计
3楼2013-10-30 11:38:52
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wanghx_2012

主管区长

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-10-30 21:00:55
首先,你是菌落PCR还是提取的DNA。
如果是DNA,建议纯化后再PCR,如果还是不行就从新设计引物;如果是菌落PCR,建议用菌龄早的小菌落,添加适量的镁离子,再做一次,如果不行就换引物。
4楼2013-10-30 15:26:57
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