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fhang0427

木虫 (正式写手)

[求助] 微生物发酵液中蛋白酶(NH4)2SO4沉淀

微生物发酵液中有所需的酶但是该菌也产生多糖(产量较高),用(NH4)2SO4沉淀法,70%左右酶与多糖同时沉下了,此时回收率也不高仅14%
这种情况如何处理
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白酶沉淀的话应该用不了70%的硫酸铵饱和度,30-50%应该够了,这个浓度下多糖可能不会沉淀那么多,建议做个硫酸铵浓度实验,看看那个浓度下沉淀出来的酶活浓度最高
2楼2013-10-22 09:39:29
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fhang0427

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huangjixiang at 2013-10-22 09:39:29
蛋白酶沉淀的话应该用不了70%的硫酸铵饱和度,30-50%应该够了,这个浓度下多糖可能不会沉淀那么多,建议做个硫酸铵浓度实验,看看那个浓度下沉淀出来的酶活浓度最高

我分别作了40%、50%、60%、70%、80%,40%、50%和80%酶活均很低,60%和70%酶活稍微高一些
3楼2013-10-22 10:34:46
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noflower110

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

发酵液的PH会不会蛋白酶的对盐析效果有影响,我们这边调过PH再进行盐析
4楼2013-11-02 22:01:37
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fhang0427

木虫 (正式写手)

送红花一朵
一般发酵后体系pH在5.7左右。
你们实验室一般将pH调至多少?酶在(NH4)2SO4多少浓度可以沉下来?
5楼2013-11-07 20:56:12
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