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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 地衣芽孢杆菌产生蛋白酶
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lyon2000000

金虫 (小有名气)

[求助] 地衣芽孢杆菌产生蛋白酶

地衣芽孢杆菌产生的蛋白酶都是碱性蛋白酶吗？有没有可能产生酸性或是中性蛋白酶呢？要检测一株地衣芽孢杆菌蛋白酶的活性应该选用什么样的培养基好呢？是直接测定发酵液中还是需要破碎菌体？呵呵，好多问题
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1楼 2011-06-01 16:44:56
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lyon2000000(金币+5): 2011-06-01 20:30:16
我做过枯草芽孢杆菌的蛋白酶，估计应该差不多，提供点参考~~~
初筛的话可以用酪蛋白（酪蛋白）培养基，配方网上很多的，加上三氯乙酸后由于菌产蛋白酶因而菌落周围没有酪蛋白，因此不会与三氯乙酸反应变白从而产生透明圈，从透明圈与菌落的直径比可以判断产酶能力大小~~~~
摇瓶测酶活力的话要用Folin-酚法~~~~~~~
蛋白酶是胞外酶，不需要破壁~~
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2楼2011-06-01 18:27:30
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

补充一下，那个三氯乙酸是培养一段时间后观察透明圈时加的~~
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3楼2011-06-01 18:35:03
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lyon2000000

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liuyu_sdili at 2011-06-01 18:35:03:
补充一下，那个三氯乙酸是培养一段时间后观察透明圈时加的~~

需要培养多久呢？呵呵，还要麻烦一下哦
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4楼2011-06-01 20:28:53
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lyon2000000

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liuyu_sdili at 2011-06-01 18:27:30:
我做过枯草芽孢杆菌的蛋白酶，估计应该差不多，提供点参考~~~
初筛的话可以用酪蛋白（酪蛋白）培养基，配方网上很多的，加上三氯乙酸后由于菌产蛋白酶因而菌落周围没有酪蛋白，因此不会与三氯乙酸反应变白从而产 ...

摇瓶测酶活的话应该选择什么样的培养基呢？呵呵
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5楼2011-06-01 20:32:25
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lyon2000000 at 2011-06-01 20:32:25:
摇瓶测酶活的话应该选择什么样的培养基呢？呵呵

这个倒是既不清了，这是我本科三年级的一个实验~~
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6楼2011-06-01 20:47:08
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oyar007

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lyon2000000 at 2011-06-01 20:28:53:
需要培养多久呢？呵呵，还要麻烦一下哦

你是需要精确测量你的最高酶活还是怎样？一般用肉汤培养基培养3-4天左右即可达到较高的蛋白酶活.
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7楼2011-06-02 09:57:52
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lyon2000000

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liuyu_sdili at 2011-06-01 20:47:08:
这个倒是既不清了，这是我本科三年级的一个实验~~

多谢多谢啦~
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8楼2011-06-02 10:26:46
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lyon2000000

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by oyar007 at 2011-06-02 09:57:52:
你是需要精确测量你的最高酶活还是怎样？一般用肉汤培养基培养3-4天左右即可达到较高的蛋白酶活.

就是普通的看一下一株菌的蛋白酶活力，不是太精确，需要那么久嘛？测定的时候是不是还要根据蛋白酶的性质（碱性，酸性，中性）选择合适pH的缓冲溶液？谢啦~
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9楼2011-06-02 10:29:56
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liuhedong1817

木虫 (正式写手)

hello
LZ是本科生吧，什么问题都要问！
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老婆的头像
10楼2011-06-02 18:07:31
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