24小时热门版块排行榜    

查看: 1789  |  回复: 7

chenxiang29

银虫 (正式写手)

[求助] 细菌接种后不生长??

本人构建好了大肠杆菌表达菌后,通过sds-page及western bolt 确定表达成功后,接下来进行大量培养表达,但是问题出现了:甘油菌经过平板划线后,挑菌落于液体LB/amp中培养,过夜培养没有生长,表达的蛋白应该是有一定毒性的,这会不会严重影响菌种活性呢?就算划线活化也没用?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

smile to the world
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smallhacker

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, guingzhu! 2013-10-11 19:25:17
有可能是,接种时,菌体量太小或没有成功接种,可待菌落大些,再接种
2楼2013-10-11 15:01:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微生物菌剂

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-10-11 19:25:32
甘油菌划线时用的平板是含有氨苄抗性?如果构建没问题的话,平板能长,LB中也应该能长的。要看看培养条件是否合适。至于楼上说的接种问题,应该不会是接种量的问题,牙签或者枪头粘一下就够了。要避免没有成功接种,可以多接几个平行试管
3楼2013-10-11 17:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenxiang29

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 微生物菌剂 at 2013-10-11 17:28:24
甘油菌划线时用的平板是含有氨苄抗性?如果构建没问题的话,平板能长,LB中也应该能长的。要看看培养条件是否合适。至于楼上说的接种问题,应该不会是接种量的问题,牙签或者枪头粘一下就够了。要避免没有成功接种, ...

谢谢!平板都是能长的,就是到了液体培养基(含氨苄)才不长的,接种不是问题
smile to the world
4楼2013-10-12 17:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenxiang29

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by smallhacker at 2013-10-11 15:01:40
有可能是,接种时,菌体量太小或没有成功接种,可待菌落大些,再接种

谢谢,我想是菌种就是不行的,可能表达的蛋白毒性较强吧,只能重新转化了
smile to the world
5楼2013-10-12 17:50:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxin9337

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

液体培养基是自配的还是购买公司的。若是自配的,有可能是PH值不合适。
6楼2013-10-13 00:43:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenxiang29

银虫 (正式写手)

内容已删除
smile to the world
7楼2013-10-13 10:28:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxin9337

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

平板连续传代能否生长?若能,则液体培养一定可以,不生长的原因只能从培养基和培养条件上去一个一个的查了。
8楼2013-10-13 20:38:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chenxiang29 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +9 SUICHILD 2026-03-12 9/450 2026-03-19 09:35 by 花店相见
[基金申请] 国自科面上基金字体 +7 iwuli 2026-03-12 8/400 2026-03-19 08:55 by sjtu2012
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[基金申请] 被我言中:新模板不强调格式了,假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +6 孔志浩 2026-03-12 11/550 2026-03-17 14:41 by 周舟舟77
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见