24小时热门版块排行榜    

查看: 1795  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chenxiang29

银虫 (正式写手)

[求助] 细菌接种后不生长??

本人构建好了大肠杆菌表达菌后,通过sds-page及western bolt 确定表达成功后,接下来进行大量培养表达,但是问题出现了:甘油菌经过平板划线后,挑菌落于液体LB/amp中培养,过夜培养没有生长,表达的蛋白应该是有一定毒性的,这会不会严重影响菌种活性呢?就算划线活化也没用?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

smile to the world
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenxiang29

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by smallhacker at 2013-10-11 15:01:40
有可能是,接种时,菌体量太小或没有成功接种,可待菌落大些,再接种

谢谢,我想是菌种就是不行的,可能表达的蛋白毒性较强吧,只能重新转化了
smile to the world
5楼2013-10-12 17:50:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

smallhacker

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, guingzhu! 2013-10-11 19:25:17
有可能是,接种时,菌体量太小或没有成功接种,可待菌落大些,再接种
2楼2013-10-11 15:01:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微生物菌剂

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-10-11 19:25:32
甘油菌划线时用的平板是含有氨苄抗性?如果构建没问题的话,平板能长,LB中也应该能长的。要看看培养条件是否合适。至于楼上说的接种问题,应该不会是接种量的问题,牙签或者枪头粘一下就够了。要避免没有成功接种,可以多接几个平行试管
3楼2013-10-11 17:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenxiang29

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 微生物菌剂 at 2013-10-11 17:28:24
甘油菌划线时用的平板是含有氨苄抗性?如果构建没问题的话,平板能长,LB中也应该能长的。要看看培养条件是否合适。至于楼上说的接种问题,应该不会是接种量的问题,牙签或者枪头粘一下就够了。要避免没有成功接种, ...

谢谢!平板都是能长的,就是到了液体培养基(含氨苄)才不长的,接种不是问题
smile to the world
4楼2013-10-12 17:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +3 vv迷 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:05 by f19980501
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +5 张vvvv 2026-03-15 7/350 2026-03-21 19:23 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +3 Surekei 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:31 by 学员8dgXkO
[考研] 工科0856求调剂 +3 沐析汀汀 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:30 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 baibai1314 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:56 by JourneyLucky
[考研] 材料工程(专)一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 323求调剂 +3 洼小桶 2026-03-18 3/150 2026-03-20 22:54 by JourneyLucky
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
信息提示
请填处理意见