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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 细菌最适生长温度测定
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libinaizuqiu

新虫 (初入文坛)

[交流] 细菌最适生长温度测定 已有7人参与

各位大侠：我现在要测细菌的最适生长温度，我的菌是欧美样溃疡病菌，和欧文氏菌情缘关系很近，我想做24、26、28、30、32、34、36和38这8个温度范围，但是我们实验室摇床少，只有俩台可供我使用，所以每次做一个温度的话，所加入的种子液浓度很难控制在相同数量级上，所以邮同学建议我做平行试验，就是其他温度和38度同时加样、测定OD值，我想问下这样做可以吗？
  还有我最开始是用的100毫升三角瓶，摇床培养24小时，OD600到1.7多；后来我用时光做，每只加5毫升LB培养基和50微升菌液，24小时后OD600才0.4多，我想请问，这是为什么？
   或者哪位大侠做过类似的实验，能否告诉我你们是如何做的？万谢！！！
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1楼 2013-06-03 11:12:42
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

见神一笑

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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好好努力
7楼2013-06-04 11:52:36
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langfei16

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
个人意见，仅供参考：
1、必须是平行试验，而且每种必须活化到最佳生长状态，一般活化2次，每次时间一般为18-24小时，具体依细菌特性
2、测定OD值时，必须是具有同样的活化代数，如都是第二、三次活化后测定，因为活化代数不一样，最后在培养24小时后，繁殖的细胞数会差别很大，OD值当然会波动较大，这样实验就没有意义。
3、实验设计很好，如果没有现成的实验条件，可换换思路，比如可将细菌活化后定量，做成菌液，然后涂布在平板培养基上，在不同时间培养后，可粗略观察到生长状况，最后再在几个近似的温度上做系统筛选！
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把结果留给别人
9楼2013-06-04 18:28:11
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普通回帖

yuanjun0106

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
5ml的培养体积和100ml的条件相同吗？
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悟
2楼2013-06-04 09:09:49
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libinaizuqiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuanjun0106 at 2013-06-04 09:09:49
5ml的培养体积和100ml的条件相同吗？

条件是一样的，加样比都是1比100，9管在28度、180r/min培养，9管在30度/32度/34度/36度培养，在12h、18h和24h分别测OD600，但是俩个温度条件培养下所测得数据相比没多大差别，书上说植物病原细菌的最适温度为28-30，可测出来28度和32/34度差别不大，不知道是为什么
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3楼2013-06-04 09:22:09
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yuanjun0106

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
5ml和100ml分别是什么容器？如果与书上描述不一致，可能是在别的条件上为达到适宜条件，导致温度条件差异为体现出。
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悟
4楼2013-06-04 09:41:57
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libinaizuqiu

新虫 (初入文坛)
100ML是在250ML的三角瓶里，5ml是在大试管里，具体毫升数我忘了，我现在就像知道，用试管测和用三角瓶测那个更准确，文献俩个都有用的
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5楼2013-06-04 09:47:54
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miniwang

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没做过这方面的实验，也正在研究，学习了
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6楼2013-06-04 09:48:48
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libinaizuqiu

新虫 (初入文坛)
???????:
7?: Originally posted by ?????Ц at 2013-06-04 11:52:36
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8楼2013-06-04 13:24:06
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libinaizuqiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by langfei16 at 2013-06-04 18:28:11
个人意见，仅供参考：
1、必须是平行试验，而且每种必须活化到最佳生长状态，一般活化2次，每次时间一般为18-24小时，具体依细菌特性
2、测定OD值时，必须是具有同样的活化代数，如都是第二、三次活化后测定，因为 ...

谢谢
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10楼2013-06-04 20:42:52
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