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蛋白重组表达,标签表达了目的蛋白没有表达。
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redx2011
银虫
(初入文坛)
应助: 2
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帖子: 48
在线: 17.8小时
虫号: 2134399
注册: 2012-11-18
专业: 微生物学
[
求助
]
蛋白重组表达,标签表达了目的蛋白没有表达。
已有1人参与
大家好,最近在做蛋白重组表达,用的是pMCSG19,LIC法将目标基因连至载体,表达菌株是BL21(DE3)及其Rosseta,用IPTG(0.5mM)诱导之后,克隆位点前面的MBP(约45KD)标签表达了,但是目标蛋白没有表达出来,请问这是什么情况?求教!!!
电泳图从左往右:Marker 0h 1h 3h 5h 7h(0h: 未加IPTG时取样电泳)
Marker从上到下分别是:116 66 45 35 25 18.4 14.4KDa
图中只有45kDa的标签条带,我做了对照,就是空载体电转至表达菌株中同时诱导,结果跟图中是一样的。
测序结果表达目标片段已经连上了载体,没有突变等其他因素。
求分析,超急的,谢谢!!
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【求助/交流】急!急!急! his标签表达的蛋白出问题了,求指导!!!
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【求助】求助目的蛋白的大小
已经有8人回复
大家一起努力
1楼
2013-10-08 20:08:30
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虫号: 6230047
注册: 2017-04-04
【答案】应助回帖
你的问题解决了吗?我也是这种情况,而且目的蛋白和mbp标签差不多大
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2楼
2018-05-11 20:14:26
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