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redx2011

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白重组表达,标签表达了目的蛋白没有表达。 已有1人参与

大家好,最近在做蛋白重组表达,用的是pMCSG19,LIC法将目标基因连至载体,表达菌株是BL21(DE3)及其Rosseta,用IPTG(0.5mM)诱导之后,克隆位点前面的MBP(约45KD)标签表达了,但是目标蛋白没有表达出来,请问这是什么情况?求教!!!
电泳图从左往右:Marker   0h   1h   3h   5h  7h(0h: 未加IPTG时取样电泳)
Marker从上到下分别是:116  66  45  35  25  18.4  14.4KDa
图中只有45kDa的标签条带,我做了对照,就是空载体电转至表达菌株中同时诱导,结果跟图中是一样的。
测序结果表达目标片段已经连上了载体,没有突变等其他因素。
求分析,超急的,谢谢!!
蛋白重组表达,标签表达了目的蛋白没有表达。
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琥珀鸠

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的问题解决了吗?我也是这种情况,而且目的蛋白和mbp标签差不多大
2楼2018-05-11 20:14:26
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