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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-page 原核表达蛋白 电泳条带弥散
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hijiwei

新虫 (初入文坛)

[交流] SDS-page 原核表达蛋白 电泳条带弥散 已有6人参与

求助，最近做了N块胶，有15%的分离胶，也有5%-20%的梯度胶跑出来的蛋白不成条带？？以前不这样啊？
菌液IPTG诱导完，离心沉淀菌体，PBS重悬，加4XSDS上样缓冲液（终浓度为1X）煮沸5min，13000rpm离心12min，在4℃保存，第二天电泳。 \"SDS-page
 \"SDS-page
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1楼 2013-10-06 20:23:00
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陈静和陈鹏

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能跟你的电泳条件和目的片段大小有关系，我做SDS-PAGE的条件是60V跑半个小时，过浓缩胶，然后120V跑1h，目的片段有60Kda的、40KDa以及20KDa。样品变性完直接上样进行电泳。胶浓度为12%，你换一下胶浓度和电泳条件，可以通过你的Marker来判断。希望能帮到你，祝你试验成功。
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7楼2014-11-22 15:33:43
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