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xinlvputao

新虫 (初入文坛)

[求助] microRNA的qRT-PCR问题

最近在用applied biosystems的TaqMan small RNA assays提供的引物做microRNA的qRT-PCR检测(其它成分也用的是life technology的相应产品:TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Kit及TaqMan PCR Master Mix),我是完全按照用户手册来做的,但是做出来的融解曲线没有明显单峰,不知是什么问题,该怎么优化。新手上路,恳请高人指教,万分感谢!!!
microRNA的qRT-PCR问题
扩增曲线.jpg


microRNA的qRT-PCR问题-1
融解曲线1.jpg


microRNA的qRT-PCR问题-2
融解曲线2.jpg
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

引物不行吧~~
总有一天我要修改用户名。
2楼2013-10-06 17:44:38
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xinlvputao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 137167741 at 2013-10-06 17:44:38
引物不行吧~~

引物是从ABI公司买的,用的是颈环逆转录引物,和TaqMan探针及正向、逆向引物,应该有保障的啊!!!
3楼2013-10-07 11:44:58
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