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woshiap

铁虫 (初入文坛)

[求助] 基因丰度低,定量CT值为0,怎么破?

请教大家一个问题,我做QPCR时候,由于我的基因在PK细胞系里表达丰度很低(普通PCR时,35个循环没有目的带,加大到48个循环就出现很亮的带),导致定量不起峰,CT值为0(将定量的产物跑胶,没有任何目的产物出现),模板量加大也还是不起峰,内参,cDNA都是好的。 现在我该怎么办?  有没什么方法可以解决。如果用Taqman探针来做定量是不是可以解决基因丰度低的问题? 请大家务必帮我! 等着毕业! 再次谢过!!
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子非鱼花儿开

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-19 01:28:07
应该跟你的模板浓度关系比较大吧,样品中没有模板或模板浓度太低或者扩增受到了抑制,个人认为换taqman探针应该不会有太大帮助。另外不太理解Ct值为0,那应该是扩增效率很高呀,你是不是要表达荧光值为零或者是未出现扩增曲线?
2楼2013-10-18 18:11:06
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