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woshiap

铁虫 (初入文坛)

[求助] 基因丰度低，定量CT值为0，怎么破？

请教大家一个问题，我做QPCR时候，由于我的基因在PK细胞系里表达丰度很低（普通PCR时，35个循环没有目的带，加大到48个循环就出现很亮的带），导致定量不起峰，CT值为0（将定量的产物跑胶，没有任何目的产物出现），模板量加大也还是不起峰，内参，cDNA都是好的。 现在我该怎么办？  有没什么方法可以解决。如果用Taqman探针来做定量是不是可以解决基因丰度低的问题？ 请大家务必帮我！ 等着毕业！ 再次谢过！！
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1楼 2013-09-24 20:48:58
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子非鱼花儿开

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-19 01:28:07
应该跟你的模板浓度关系比较大吧，样品中没有模板或模板浓度太低或者扩增受到了抑制，个人认为换taqman探针应该不会有太大帮助。另外不太理解Ct值为0，那应该是扩增效率很高呀，你是不是要表达荧光值为零或者是未出现扩增曲线？
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2楼2013-10-18 18:11:06
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