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ufowjing

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[求助] 【求助】SDS-PAGE条带跑不出来

做的10%斑马鱼肝脏匀浆，手工匀浆。匀浆后12000g离心10min，煮沸上样前12000g离心10min。
之前求助过条带很少，有同学建议用裂解液做介质匀浆。
买了索莱宝的高效RIPA裂解液，再跑出来的条带依然很少，并且染色后条带上方有竖条出现。
第一个图图上marker左边的两条是用裂解液的匀浆，再左边的两条是用PBS做的匀浆。想求助一下各位研友，条带跑不出来是样品的提取有问题吗？之前实验室的师兄用PB提取的匀浆跑出来的条带很清晰很多。
还有裂解液跑出来的条带上方为什么会有竖条出现？

第二张图的条带全是用裂解液匀浆的，条带两侧全是竖条的原因是什么？
谢谢各位研友的指导。

IMG_2105.JPG

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1楼 2013-09-22 22:11:40

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ufowjing

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引用回帖:

3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-23 00:47:53
第一张图的marker跑得也不好，可能是胶没做好或者电泳的问题。第二张图marker条带分得还行，说明是样品的问题。用缓冲液匀浆条带少是因为破碎不完全或者样品蛋白浓度过低。用裂解液匀浆也是可以的，不过先要弄清楚所 ...

谢谢您的回答，裂解液是用的索莱宝的高效RIPA裂解液，盐分浓度过高对跑出来的条带具体会有什么影响？？