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xulong712711铜虫 (初入文坛)
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【答案】应助回帖
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gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2013-10-02 00:27:27
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2013-10-02 00:27:27
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Bradford法测定蛋白质浓度 1.目的: 练习标准曲线的制作,比较不同pH值的蛋白质标准溶液对测定的影响。 2.试剂: ①显色剂:取100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85%(w/v)磷酸,将溶液用水稀释到1000ml。 ②BSA标准溶液(1000µg/ml),分别用0.01N盐酸,去离子水,0.01N NaOH溶液配制,4℃冰箱放置可保存一周。 3.设备与仪器: 微量移液器:一支用于专吸BSA;一支用于专吸dH2O 岛津UV-265紫外可见光分光光度计 4.操作程序: 试管号 1 2 3 4 5 6 BSA(µl) 0 10 20 40 70 100 去离子水(µl) 100 90 80 60 30 0 显色剂(ml) 5 5 5 5 5 5 加显色剂混匀,静止2min后测定OD595,建立标准曲线 注:①显色液中G-250,出现沉淀不能用。 ②定容BSA标准液时,混合次数,以保证混匀。 样品的加入同BSA的加入。如果OD太高,减少加入量 |
2楼2013-10-02 00:24:00













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