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xulong712711铜虫 (初入文坛)
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考马斯亮蓝法具体步骤
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【答案】应助回帖
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gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-10-02 00:27:27
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-10-02 00:27:27
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Bradford法测定蛋白质浓度 1.目的： 练习标准曲线的制作，比较不同pH值的蛋白质标准溶液对测定的影响。 2.试剂： ①显色剂：取100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85%（w/v）磷酸，将溶液用水稀释到1000ml。 ②BSA标准溶液（1000µg/ml），分别用0.01N盐酸，去离子水，0.01N NaOH溶液配制，4℃冰箱放置可保存一周。 3.设备与仪器： 微量移液器：一支用于专吸BSA；一支用于专吸dH2O 岛津UV-265紫外可见光分光光度计 4.操作程序： 试管号 1 2 3 4 5 6 BSA（µl） 0 10 20 40 70 100 去离子水（µl） 100 90 80 60 30 0 显色剂（ml） 5 5 5 5 5 5 加显色剂混匀，静止2min后测定OD595，建立标准曲线 注：①显色液中G-250，出现沉淀不能用。 ②定容BSA标准液时，混合次数，以保证混匀。 样品的加入同BSA的加入。如果OD太高，减少加入量 |
2楼2013-10-02 00:24:00
