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witake

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[求助] 急求PCR 求实验指导 PCR

PCR
引物nearest neighbor 都在55度左右。做57、59连个梯度是有非特异条带(BLAST过了，引物是很特异的），53 55 PCR得到的目的条带很淡，而引物条带挺亮。之前觉得是模板量少，但加大了量效果也没什么变化。25ul的体系，Taq酶是按0.2+0.1步骤加。还有一个现象就是：当我做50ul的体系有时没有目的条带，而25ul体系一般都有目的条带。现在实验不能往下做了，求各位指点迷津！

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1楼2013-09-13 10:50:46

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