24小时热门版块排行榜    

查看: 2357  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

赵建雪

银虫 (正式写手)

[求助] 根据文献提DNA,但提出来却是RNA,为什么呀

根据甜樱桃DNA的快速提取法文献提DNA,但提出来却是RNA,为什么呀
在装有备用材料的115ml离心管中加入
500μl经过预热的十六烷基三乙基溴化胺
(CTAB)提取液,该提取液含pH810的75mmol/L
Tris- HCl缓冲液, pH810的115mmol/L乙二胺
四乙酸(EDTA), 1105mol/L氯化钠, 115%十六
烷基三乙基溴化胺, 2%β-巯基乙醇。置65℃
水浴中30分钟,加入等体积的酚∶氯仿(1∶1),
充分混匀,静置10分钟,在每分钟6000转的离
心机上离心5分钟,然后取上清液置于另一离心管中,加入2倍体积的无水乙醇和015倍体积
的5mol/L氯化钠,于- 20℃下放置15分钟后,
每分钟8000转离心5分钟, 弃上清液。用
70%乙醇洗DNA沉淀一次,风干,加100μl超
纯水溶解。取1μl上样,用018%琼脂糖凝胶
电泳检测DNA的质量和浓度。 提取后电泳图像如下图,后四个是提的样,樱桃
根据文献提DNA,但提出来却是RNA,为什么呀
IMG_20130911_171628.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

自己的路只有自己能负责
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangleiyu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
赵建雪: 金币+2 2013-12-22 20:28:54
甜樱桃DNA提取时,加样量一定要少一点,裂解液体积最好多一点,我们实验室一般都用的是1000ul。加样量多了反而会提不出DNA。
5楼2013-09-18 20:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

longanzz

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
赵建雪: 金币+1 2013-12-22 20:27:11
1105mol/L氯化钠, 115%十六烷基三乙基溴化胺, 这个是真的吗?加点RNA酶处理一下就没有了。
2楼2013-09-12 07:53:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DNA和RNA的很多性质都比较类似,在提取的时候,尽管不同的方法可能对其中一种有偏向性,但是不能完全的把另一种给完全排除。 所以提取完了,要对你不需要的进行处理。DNA中的RNA是最好除去的,加RNase就可以了。对于RNA中的DNA, 要用RNasefree的DNase来处理。
4楼2013-09-12 16:02:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三只小老虎

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有几个问题,你要注意,1、你的离心转速普遍过小,DNA沉淀不下去。一般我们都用12000rpm。2、你的电泳跑的时间过短,再多跑20分钟看看。3\加点rna酶处理一下。
一般提DNA,你要想保证产量的话,就尽可能的减少实验步奏,降低消耗。还有就是速度快,保持低温。
如果你的dna次生物质,如多糖,蒽,醌类较多的话,直接用试剂盒,速度快,产量高,还干净,可以用来做AFLP等酶切工作。
6楼2013-09-28 10:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +6 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-17 01:50 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 22:26 by Tql5LQhh5rLK
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-16 21:26 by MHf40yA0Uhyb
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-16 21:26 by MHf40yA0Uhyb
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-16 19:27 by rRvxEj3zorCy
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 11/550 2026-09-16 18:37 by rRvxEj3zorCy
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-16 18:36 by rRvxEj3zorCy
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-16 18:00 by i3KBRD19ERkG
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 17:12 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-16 15:24 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-16 07:48 by i0IGWqQuchto
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:15 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 申博发邮件 +4 Lmengk 2026-09-15 4/200 2026-09-16 00:05 by 木心想继续深造
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:26 by zNcEhTcH7ihq
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[基金申请] 求教各位大神:2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀? +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
信息提示
请填处理意见