24小时热门版块排行榜    

查看: 2047  |  回复: 10

赵建雪

银虫 (正式写手)

[求助] 根据文献提DNA,但提出来却是RNA,为什么呀

根据甜樱桃DNA的快速提取法文献提DNA,但提出来却是RNA,为什么呀
在装有备用材料的115ml离心管中加入
500μl经过预热的十六烷基三乙基溴化胺
(CTAB)提取液,该提取液含pH810的75mmol/L
Tris- HCl缓冲液, pH810的115mmol/L乙二胺
四乙酸(EDTA), 1105mol/L氯化钠, 115%十六
烷基三乙基溴化胺, 2%β-巯基乙醇。置65℃
水浴中30分钟,加入等体积的酚∶氯仿(1∶1),
充分混匀,静置10分钟,在每分钟6000转的离
心机上离心5分钟,然后取上清液置于另一离心管中,加入2倍体积的无水乙醇和015倍体积
的5mol/L氯化钠,于- 20℃下放置15分钟后,
每分钟8000转离心5分钟, 弃上清液。用
70%乙醇洗DNA沉淀一次,风干,加100μl超
纯水溶解。取1μl上样,用018%琼脂糖凝胶
电泳检测DNA的质量和浓度。 提取后电泳图像如下图,后四个是提的样,樱桃
根据文献提DNA,但提出来却是RNA,为什么呀
IMG_20130911_171628.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

自己的路只有自己能负责
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

gskekeai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
内容已删除
3楼2013-09-12 08:27:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三只小老虎

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有几个问题,你要注意,1、你的离心转速普遍过小,DNA沉淀不下去。一般我们都用12000rpm。2、你的电泳跑的时间过短,再多跑20分钟看看。3\加点rna酶处理一下。
一般提DNA,你要想保证产量的话,就尽可能的减少实验步奏,降低消耗。还有就是速度快,保持低温。
如果你的dna次生物质,如多糖,蒽,醌类较多的话,直接用试剂盒,速度快,产量高,还干净,可以用来做AFLP等酶切工作。
6楼2013-09-28 10:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

longanzz

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
赵建雪: 金币+1 2013-12-22 20:27:11
1105mol/L氯化钠, 115%十六烷基三乙基溴化胺, 这个是真的吗?加点RNA酶处理一下就没有了。
2楼2013-09-12 07:53:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DNA和RNA的很多性质都比较类似,在提取的时候,尽管不同的方法可能对其中一种有偏向性,但是不能完全的把另一种给完全排除。 所以提取完了,要对你不需要的进行处理。DNA中的RNA是最好除去的,加RNase就可以了。对于RNA中的DNA, 要用RNasefree的DNase来处理。
4楼2013-09-12 16:02:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangleiyu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
赵建雪: 金币+2 2013-12-22 20:28:54
甜樱桃DNA提取时,加样量一定要少一点,裂解液体积最好多一点,我们实验室一般都用的是1000ul。加样量多了反而会提不出DNA。
5楼2013-09-18 20:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三只小老虎

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

再加一句:
加入等体积的酚∶氯仿(1∶1),
连续充分混匀10分钟,然后快速4度离心。
7楼2013-09-28 10:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zdh707

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

药品24比1,离心再快一些,dna提取过程中会出现rna.
待秋风再次吹起落叶,就算天空下起毛毛细雨,也不要在屋里偷懒,要去地里收白菜,刨红薯
8楼2013-10-14 23:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

东湖雨

金虫 (正式写手)

http://bbs.freekaoyan.com/f

【答案】应助回帖

离心过程转速设置偏低
【Fky】药学化学交流220843857;[FKYCHEM]化学考研交流108487998
9楼2013-10-28 01:05:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵建雪

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by longanzz at 2013-09-12 07:53:55
1105mol/L氯化钠, 115%十六烷基三乙基溴化胺, 这个是真的吗?加点RNA酶处理一下就没有了。

不好意思,复制的时候出错了
自己的路只有自己能负责
10楼2013-12-22 20:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 赵建雪 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 调剂 +8 调剂的考研学生 2026-03-09 8/400 2026-03-15 22:14 by Winj1e
[文学芳草园] 伙伴们,祝我生日快乐吧 +15 myrtle 2026-03-10 24/1200 2026-03-15 21:16 by 苏州_逗号
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +5 热爱生活ing 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:39 by JourneyLucky
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 工科,求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 Zz版 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:36 by 18595523086
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
信息提示
请填处理意见