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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 【求助】如何分离提取食品中的游离氨基酸（氨基酸分析仪测定）
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kl1112

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】如何分离提取食品中的游离氨基酸（氨基酸分析仪测定）

最近要做食品中的游离氨基酸的测定（采用氨基酸分析仪水解系统分析游离氨基酸）。
样品中含有蛋白质、多肽（低聚肽）、游离氨基酸、糖类（包括多糖类和纤维素）等。缓冲液和茚三酮溶液，以及仪器分析方法，都是仪器工程师提供的。

刚开始时，分别采用乙醇、磺基水杨酸、三氯乙酸来沉淀，离心，过滤膜，最后测出来的效果也都不好，杂质峰比较多。也试过用游离系统来做，效果更差。

我是刚接触氨基酸分析仪&氨基酸检测，没啥经验。
还请各位前辈们指教。先谢谢了。
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1楼 2013-08-17 23:15:36
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xdz1978

至尊木虫 (文坛精英)

持之以恒！

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kl1112: 金币+3, ★有帮助 2013-08-19 10:55:03
这个方法可以参考
http://www.tech-food.com/kndata/1000/0000560.htm
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一身正气，两袖清风，三餐温饱，四大皆空！
2楼2013-08-18 09:41:05
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35779270

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kl1112: 金币+3, ★有帮助 2013-08-19 10:55:20
我也推荐国标《水果、蔬菜汁 游离氨基酸含量的测定》，但是上面很麻烦的要过阳离子交换树脂柱子的。你做的是什么样品，我原来测牛奶和葡萄酒中的游离氨基酸，用磺基水杨酸处理，用氨基酸分析仪测定，结果还可以的。多交流啊！
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3楼2013-08-18 17:01:02
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kl1112

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xdz1978 at 2013-08-18 09:41:05
这个方法可以参考
http://www.tech-food.com/kndata/1000/0000560.htm

谢谢你的回复。
用“阳离子交换树脂”纯化，效果是比较好，这个我有考虑过，然而相应的操作也比较复杂耗时。另外，我检测中心就我一个人做，样品也比较多，而且我还要做其他项目检测，时间上不够呀，所以暂时不考虑这个方法，除非真的没有其他比较简单的方法。
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4楼2013-08-19 09:17:36
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kl1112

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 35779270 at 2013-08-18 17:01:02
我也推荐国标《水果、蔬菜汁 游离氨基酸含量的测定》，但是上面很麻烦的要过阳离子交换树脂柱子的。你做的是什么样品，我原来测牛奶和葡萄酒中的游离氨基酸，用磺基水杨酸处理，用氨基酸分析仪测定，结果还可以的。 ...

相关的国标企标进出口的方法，我都看过了，大致就是用盐酸、磺基水杨酸、乙醇、三氯乙酸来沉淀提取，对于比较简单的样品还可以。对于复杂点的样品，增加阳离子交换树脂来纯化，效果会很好。

我做的样品是类似于麦片（就是配好的，可以直接冲的），有蛋白质、多肽（包括二聚三聚等可溶性低聚肽）、游离氨基酸、糖类（包括多糖和纤维素），还有一些不知什么的物质，就是成分比较杂。
我刚开始尝试用盐酸和磺基水杨酸来沉淀提取，可是离心过水膜后滤液依然很浑浊。
后来尝试用三氯乙酸和乙醇，离心过水膜后滤液就很清澈，但是图谱上显示很多杂峰（重叠到氨基酸峰了）。
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5楼2013-08-19 09:28:40
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yhling157

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kl1112 at 2013-08-19 09:28:40
相关的国标企标进出口的方法，我都看过了，大致就是用盐酸、磺基水杨酸、乙醇、三氯乙酸来沉淀提取，对于比较简单的样品还可以。对于复杂点的样品，增加阳离子交换树脂来纯化，效果会很好。

我做的样品是类似于 ...

你用的三氯乙酸是多大浓度的？我想提取游离氨基酸，但是用磺基水杨酸提取没有沉淀，溶液是澄清的？

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6楼2016-07-19 20:12:05
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sheppard

木虫 (正式写手)
乙醇、磺基水杨酸、三氯乙酸 沉淀蛋白的效果是不错的，只是总会有些短肽、小结构蛋白无论如何处理都无法沉淀。这些短肽、小结构蛋白会影响最终出峰，比如肩峰、杂峰，分离度也不一定好。所以就算沉淀蛋白了，上清液还是要做一次酸解步骤，跑出来的结果就很好了。后来因为实验室危化试剂、高温设备等管理，做起来不方便，外面有机构做价格不高就都送样送检了，具体操作有疑问可以咨询扣扣3594231261，他们比较有经验
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7楼2022-01-15 11:47:56
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