应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC分离氨基酸问题
151/2返回列表12下一页
查看: 2475  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Julia0_0

新虫 (小有名气)

[求助] HPLC分离氨基酸问题 已有1人参与

HPLC检测发酵液中氨基酸含量，用的是安捷伦C18 5μm 4.6*150mm柱，邻硝基苯磺酰氯做衍生剂，最开始做单个氨基酸标准样时都能出峰，但可以看出出峰时间比较接近。当讲单个标样混合再测时，就发现氨基酸都混在一起，只出来一个峰都没法分开了。。。想请教大家用什么办法能解决这一问题吗？

比如选用什么流动相，浓度、pH怎么选择，流速温度梯度如何设定等。帮帮我吧~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-11 20:19:25
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skenm

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+2, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 ^ ^ 2012-07-12 09:47:31
氨基酸用普通HPLC不好做，如果你不是在线衍生的话就更不好做了，包括样品和衍生剂都太不稳定，做出来基本就是一坨峰，另外你发酵液水解了吗？要测游离氨基酸还是水解氨基酸，处理方法也不一样。
还是用专业氨基酸仪做吧，就算用氨基酸仪，很多样品做出来峰型也不理想的
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-11 20:29:25
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 用过这柱子吗，好用否？ 2012-07-12 09:48:04
楼主试试Agilent的AAA柱喃 这是一款专门的氨基酸测试柱
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-11 20:44:02
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+3, 非常全面，感谢分享 2012-07-12 09:53:00
aglient有一个专门做氨基酸在线衍生的分析方法的，你看看应该对你有帮助
安捷伦氨基酸柱前衍生分析方法.pdf
http://kuai.xunlei.com/d/GUSJTLAXVDIZ?p=130497
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-12 08:42:37
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swt1898

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这方法台麻烦了，可以用氨基柱试试
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-12 10:59:37
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

32862500

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
氨基酸 在反相中出峰比较快，建议选择氨基酸柱 ，这样可以有一定的保留。 有保留才有分离的希望。
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-12 11:20:14
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
调整流动相及pH入手，其次梯度入手，柱温可控40℃。需要慢慢调试摸索，没有一蹴而就。
赞一下 回复此楼
守候在风中的宁静。
7楼2012-07-12 14:07:42
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifucheng at 2012-07-11 20:44:02
楼主试试Agilent的AAA柱喃 这是一款专门的氨基酸测试柱

我有同事用过 帮楼主问问哈
赞一下 回复此楼
8楼2012-07-12 19:41:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiao49562000

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据氨基酸的等电点选择合适的ph，设置梯度洗脱的程序，多试试！祝顺利
赞一下 回复此楼
9楼2012-07-12 20:29:46
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Julia0_0

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by skenm at 2012-07-11 20:29:25
氨基酸用普通HPLC不好做，如果你不是在线衍生的话就更不好做了，包括样品和衍生剂都太不稳定，做出来基本就是一坨峰，另外你发酵液水解了吗？要测游离氨基酸还是水解氨基酸，处理方法也不一样。
还是用专业氨基酸仪 ...

用氨基酸仪做是不太可能了，老板不会同意。。。只好HPLC不断摸索了。。。
赞一下 回复此楼
10楼2012-07-13 20:47:59
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Julia0_0 的主题更新
151/2返回列表12下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +6 Losir 2026-03-12 7/350 2026-03-17 12:09 by danranxie
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 326求调剂 +4 诺贝尔化学奖觊� 2026-03-15 7/350 2026-03-16 17:11 by 诺贝尔化学奖觊�
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 zjy101327 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:48 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +6 Liyouyumairs 2026-03-11 6/300 2026-03-13 20:11 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭