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lijianfu12

银虫 (正式写手)

[交流] 质粒电泳求助 已有4人参与

本人菜鸟提了个质粒,载体是pMD™ 18-T Vector Cloning Kit,我的目的基因大概是2000bp左右!但今天用takara公司试剂盒提出质粒,跑电泳得到这样的图!按预期条带应该在5000bp的!求大神指点!谢谢。。。
质粒电泳求助
质粒电泳.png
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Sthunder

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-08-17 12:25:23
你这是什么marker啊,你的样品跑出的带是多大呢,如果远超过5K的话,就是gDNA!~
互助互励,共奋共进!!
2楼2013-08-17 11:42:06
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

我的marker是15000的!那意思是我的目的片段没连上?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
3楼2013-08-17 12:10:28
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-17 11:42:06
你这是什么marker啊,你的样品跑出的带是多大呢,如果远超过5K的话,就是gDNA!~

我用的是15000marker,gDNA?那意思是我的目的片段没有连上还是?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
4楼2013-08-17 12:13:51
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
连T载体时,先做菌落PCR,挑PCR阳性克隆菌,再摇菌抽质粒,感觉是你的质粒提取的不好,即使没有连上也有空载的
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2013-08-17 12:26:28
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15879003030

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by lijianfu12 at 2013-08-17 12:13:51
我用的是15000marker,gDNA?那意思是我的目的片段没有连上还是?
...

他的意思是如果片段大小远超5kb  就是基因组dna。

目的片段有没有连上你之前菌落PCR就应该可以验证到啊,验证完了再抽质粒肯定可以抽到东西的。  就看你抽质粒操作了。
6楼2013-08-17 12:28:20
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

哦……谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
7楼2013-08-17 12:35:11
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by gyesang at 2013-08-17 12:26:28
连T载体时,先做菌落PCR,挑PCR阳性克隆菌,再摇菌抽质粒,感觉是你的质粒提取的不好,即使没有连上也有空载的

菌液PCR能出来目的条带!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
8楼2013-08-17 12:39:32
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gyesang

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by lijianfu12 at 2013-08-17 12:39:32
菌液PCR能出来目的条带!
...

那可能是你质粒提取的不好
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
9楼2013-08-17 12:50:50
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lijianfu12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lijianfu12 at 2013-08-17 12:39:32
菌液PCR能出来目的条带!
...

谢谢哈!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
好好搞学术
10楼2013-08-17 15:08:54
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