24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

cqqxmc

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 270.5
散金: 9
帖子: 57
在线: 41.9小时
虫号: 2252233
注册: 2013-01-21
性别: MM
专业: 植物遗传学

[交流] 关于变性蛋白做抗体的问题

书上和公司都说变性蛋白可以直接做抗体，如果蛋白溶解在8M尿素里，可以直接打兔子吗？

回复此楼

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2013-08-09 11:10:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cqqxmc

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 270.5
散金: 9
帖子: 57
在线: 41.9小时
虫号: 2252233
注册: 2013-01-21
性别: MM
专业: 植物遗传学

谢谢楼上各位！
只是觉得透析麻烦，也担心效果不好，所以不想透析
这个蛋白是形成了包涵体，洗涤包涵体之后发现蛋白经常不挂柱，由于蛋白纯度已经比较高，所以不想再纯化了，就想直接做抗体。
我们平常用抗体做WB和ELISA比较多，所以觉得变性的更好一点

赞一下

回复此楼

7楼2013-08-11 09:17:49

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 8 个回答

Sthunder

木虫 (正式写手)

应助: 130 (高中生)
金币: 2337.8
散金: 15
红花: 9
帖子: 308
在线: 176.6小时
虫号: 2551016
注册: 2013-07-17
性别: GG
专业: 生物化学

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-09 13:04:04
cqqxmc: 金币+1 2013-08-11 10:11:09

变性蛋白是i可以直接打兔子，但还是把尿素除去吧（做个透析就好），兔子也好受点嘛！呵呵

赞一下

回复此楼

互助互励，共奋共进！！

2楼2013-08-09 11:15:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

应助: 38 (小学生)
金币: 1015.6
帖子: 385
在线: 100.5小时
虫号: 604092
注册: 2008-09-16
性别: GG
专业: 食品科学基础

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+5, 专业！ 2013-08-09 13:04:54
gyesang: 回帖置顶 2013-08-09 13:04:57
cqqxmc: 金币+1 2013-08-11 10:11:05

抛砖引玉。。。。。。
变性蛋白做抗原得到的抗体，识别的是线性的氨基酸序列信息，而天然蛋白做抗原得到的抗体识别的是蛋白质的表位构型。因而前者可以识别变性的蛋白，如果抗原识别位点的氨基酸序列在天然蛋白中位于表面，那么同样可以识别对应的天然蛋白。因而前者可以用于WB,但未必可以用于IP。同理，后者抗体识别的是蛋白质的表位构型，那么抗体可以应用于IP，如果识别位点的构成是线性氨基酸序列，则抗体同样可以用于WB,如果是肽段折叠构成的位点，那么则不能用于WB.
我觉得很有道理，做抗体的话最好去除尿素，简单的透析一下就可以的

赞一下(1人)

回复此楼

自主创业者，捣腾生物试剂

3楼2013-08-09 11:19:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖