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转膜缓冲液的作用？
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可以说的具体一点吗？越详细越好。谢谢各位啦！ |
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cicelyzh
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| 给电场提供介质，与电泳的原理差不多，让蛋白或者核酸在电场力的作用下从负极向正极泳动。转膜缓冲液有多种配方，我不知道你特指哪种。如果是指做western的Tris-甘氨酸系统，tris-glycine用于维持一定pH的缓冲液，甲醇维持一定疏水性，并在一定程度上限制分子扩散。有些配方里面有SDS，主要是可以给蛋白增加负电性，提高蛋白在电场下的泳动速度。 |
2楼2013-08-02 22:24:40
Sthunder
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【答案】应助回帖
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试剂 1.1 PBS缓冲液：137millimolar/L NaCl，2.7millimolar/L KCl，10millimolar/L Na2HPO4，2millimolar/L KH2PO4，pH为7.5。 1.2 1×转移Buffer（4℃保存） 甘氨酸 14.4g Tris-base 3.03g 甲醇 200ml 加水定容至1000ml。 1.3 10×TBS： NaCl 45g Tris-base 60.6g 水 加到300ml 用浓HCl调pH至7.5，定容至500ml。 1.4 封闭液 1.5g脱脂奶粉加到30ml 1×TBS中。 1.5 T·TBS： 1000ml 1×TBS加入2ml Tween-20混匀。 1.6 抗体稀释液： 10 ml T·TBS加入0.5g脱脂奶粉。 1.7 DAB显色液（10ml）： DAB 6mg Tris（0.01M, pH7.6） 9ml NiCl2(0.3%，w/v) 1ml 30% H2O2 10μl |
3楼2013-08-02 22:26:09
4楼2013-08-02 22:38:17
Sthunder
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5楼2013-08-02 23:34:46
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