应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问western的目的蛋白为什么经常出现两行条带？？？
81/1返回列表
查看: 4087  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

aprils1988

新虫 (初入文坛)

[交流] 请问western的目的蛋白为什么经常出现两行条带？？？ 已有6人参与

请问western的目的蛋白为什么经常出现两行条带？？？
请问为什么用同样一对样本5月份做western好好的，这个月会变成这样两行条带？？？
连着发生了两次，另外一对癌和癌旁的样本也是这样，两行。

下图为5月份的western 结果
请问western的目的蛋白为什么经常出现两行条带？？？-1

一抗是国外某实验室自己提纯的单克隆抗体，1：5000
或者是目的蛋白过了两个月水解了？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-29 21:01:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sthunder

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白降解的可能性很小，不过你可以看看大小，看两条带之和是否与蛋白初始大小一致！我个人觉得你可以检查一下大小，看是否存在二聚体，或者蛋白偶合，又或者存在同工酶的情况！good luck！
赞一下 回复此楼
互助互励，共奋共进！！
2楼2013-07-29 21:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PAGE胶的浓度是一致的吗？我一师妹在不同浓度下也出现了一条变两条的情况，目前也不知道原因，猜测可能是蛋白存在磷酸化、甲基化等修饰。
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-30 08:44:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木笑子

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有可能存在蛋白降解现象，我的样品放久了，就是出现两条带，而新鲜的样品则是一条带。
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-30 09:55:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sc5921041

木虫 (著名写手)
跟抗体有关系
回复此楼
nostalgia
5楼2013-07-30 10:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiang701820

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能原因：1，回收抗体的时候与其他抗体混在一起了
          2，抗体可能本身特异性不是特别好，存在杂带，所以可能第一次和第二次裁膜的时候位置不一样，第一次杂带没显出来。
          3，WB各种条件也会影响
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-01 17:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aprils1988

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by joan198108 at 2013-07-30 08:44:12
PAGE胶的浓度是一致的吗？我一师妹在不同浓度下也出现了一条变两条的情况，目前也不知道原因，猜测可能是蛋白存在磷酸化、甲基化等修饰。

呵呵，我最后问了老板，解释：肝组织里含血比较多，新出现的第二行条带正好在25KD的位置，他解释可能是Ig轻链，不过为什么一抗会结合到Ig轻链上我还没仔细想。。。。所以解决办法就是直接转膜前把胶上25kd的胶切掉。。。
赞一下 回复此楼
7楼2013-08-08 20:42:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangbighui

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你确定一下你的抗体浓度和蛋白浓度，上样的蛋白浓度高了就会出现这个情况。另外你在确认一下你的曝光时间，将曝光时间缩短。
赞一下 回复此楼
成功，就是成为你想成为的人
8楼2013-08-09 09:11:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 aprils1988 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +8 zju2000 2026-09-26 9/450 2026-09-29 13:47 by ahsoarli
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[有机交流] 同一个分子，一条来自文献，一条来自AI——不告诉你答案，你会选哪条？ +3 tianxiaoxian 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:44 by tianxiaoxian
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭