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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相出峰问题
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焕然烟雨

铁虫 (小有名气)

[求助] 高效液相出峰问题

求助高手，我用高效液相进了20微升玉米赤霉烯酮标准品乙腈溶液10ppm，用乙腈：甲醇：水（加了一点乙酸铵）=55：10：35，出了两个连着的峰，前一个峰高，后一个峰低，请问是怎么回事儿呀？急急急
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1楼 2013-07-23 17:52:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lw1237

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
改变流速试试看，要不再换下流动相组成

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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liuwei
8楼2013-07-24 12:12:05
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普通回帖

872184585

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是标准??就出峰分岔???？???以从以下方法试一下:1.有没有???能是你本身柱??的问题？2.???以试一下??动相的梯度，或改???一下pH值试试。我现在也是这??问题，??过我??是标准??出峰，而是在测制剂中的???物时会这样，已??堵在这好几个月了，准备明天调一下??动相，推迟出峰时间看看。

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-07-23 23:46:29
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suruiqin

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般有些对照品都不是很纯，我们只是用它来定位，还有一种可能就是你的柱子是不是不太好使啊
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3楼2013-07-24 10:29:23
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焕然烟雨

铁虫 (小有名气)
???????:
2?: Originally posted by 872184585 at 2013-07-23 23:46:29
你是标准??就出峰分岔???？???以从以下方法试一下:1.有没有???能是你本身柱??的问题？2.???以试一下??动相的梯度，或改???一下pH值试试。我现在也是这 ...

?????????????????????????????????????????
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4楼2013-07-24 10:35:58
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焕然烟雨

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by suruiqin at 2013-07-24 10:29:23
一般有些对照品都不是很纯，我们只是用它来定位，还有一种可能就是你的柱子是不是不太好使啊

那怎么看是不是柱子本身的问题呢？会不会是流动相还需要优化呢？还有加乙酸铵的作用是什么呢？
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5楼2013-07-24 10:48:08
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suruiqin

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
焕然烟雨: 金币+4, ★有帮助 2013-07-26 11:42:14
引用回帖:
5楼: Originally posted by 焕然烟雨 at 2013-07-24 10:48:08
那怎么看是不是柱子本身的问题呢？会不会是流动相还需要优化呢？还有加乙酸铵的作用是什么呢？...

乙酸胺一般是用来改善色谱峰形的吧，如果是那两个峰是样品中带的，那你就略调一下流动相中乙腈或甲醇的比例，让他们与主峰稍微分开些，使分离度达到要求即可
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6楼2013-07-24 10:55:14
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焕然烟雨

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by suruiqin at 2013-07-24 10:55:14
乙酸胺一般是用来改善色谱峰形的吧，如果是那两个峰是样品中带的，那你就略调一下流动相中乙腈或甲醇的比例，让他们与主峰稍微分开些，使分离度达到要求即可...

我调了一下有机相和水相的比例，图片已经上传，请帮我分析一下，看是什么原因，谢谢啦！
高效液相出峰问题
ZON.jpg
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7楼2013-07-24 11:29:53
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ying_cheng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
焕然烟雨: 金币+1, ★有帮助 2013-07-26 11:42:32
1、进空白乙腈对比一下，看看是样品带进来的还是系统本身的
2、重新配标样，浓度大一点，看那两个峰是不是跟着都变大了。如果是柱子的原因，进样量保持不变的话，因系统原因出现的那个峰就不会变大，如果不是系统原因，那就继续优化流动相吧，或者换柱子试试
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9楼2013-07-24 12:36:51
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suruiqin

版主 (知名作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 焕然烟雨 at 2013-07-24 11:29:53
我调了一下有机相和水相的比例，图片已经上传，请帮我分析一下，看是什么原因，谢谢啦！

ZON.jpg
...

可能是多个峰没分开，你一个一个的调，比如，先调低乙腈试试，别改甲醇比例
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10楼2013-07-26 12:09:17
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